实验

4

细胞骨架的显示及观察

姓名：李思露

学号：

131140040

一、

实验目的

1.

掌握用考马斯亮蓝

R250

染色观察动物和植物细胞骨架的原理和方法。

2.

了解免疫荧光法检测细胞成分的原理和方法。

二、

实验原理

1.

细胞骨架：指真核细胞中的蛋白纤维网架体系。广义的细胞骨架包括细胞核骨架、

细胞质骨架、细胞膜骨架和细胞外基质。

狭义的细胞骨架是指细胞质骨架，

包括微

管（

microtubule

，

MT

）

、微丝（

microfilament

，

MF

）

、中间纤维（

intermediated

filament

，

IF

）

。

2.

微管微管是细胞内由微管蛋白形成的直径约

20~26nm

的长度不一的小管。分布在核周围，

呈放射状向胞质四周扩散，主要确定膜性细

胞器的位置和作为膜泡运输的导管。微管蛋

白有α和β

两种。

α

β异二聚体沿纵向聚

合成丝，原丝成环状排列形成微管的壁。微管

不稳定，对低温（冷冻）

、高压等物理因素及

秋水仙素（微管断裂剂）等化学因素敏感。紫

杉醇可以和微管蛋白多聚体结合，抑制微管解

聚。

3.

微丝：真核细胞内是主要由肌动蛋白（

actin

）组

成的直径为

5

～

7nm

的骨架纤丝。主要分布在细胞

质膜的内侧，作用是确定细胞表面特征、并与细胞

运动、收缩、内吞等功能有关。脊椎动物肌动蛋白

分为α、β和γ三种类型，不同种类细胞中肌动蛋

白组成不同。肌动蛋白单体为球形，依次连接成链，

两串肌动蛋白链互相缠绕扭曲成一股微丝。细胞松

弛素

B

为微丝断裂剂。

4.

中间纤维：直径介于微丝和微管之间（

7~11nm

）

、由多种不同蛋白组成的细胞骨架