一、材料
非消毒物品 

1.D-PBSA

2.底物：X-gal（nvitrogen），以二甲基甲酰胺配成20mg/mL，用多聚丙烯管-20℃避光保存，最长可达6个月 

3.固定液：1.8%的甲醛和0.05%戊二醛，均以PBSA液配制；将85mL水、10mL的10×D-PBSA、5mL福尔马林（37%甲醛溶液）及0.2mL戊二醛（25%溶液）混合，制备成固定液，于4℃储存 

4.染色液：含5mmol/L铁氰钾，5mmol/L亚铁氰钾，2mmol/LMgCl₂，以D-PBSA配制，4℃储存 

5.底物/染色液：1mg/mLX-gal，以染色液配制，现用现配 

6.含10%甲醛的D-PBSA液 

7.将β-gal的表达质粒作为报告基因转染（如：pcMVβ-gal）

二、操作步骤：
1.用2mLD-PBSA液洗涤细胞（如在6孔培养板上）。

2.用1mL固定液于室温下固定细胞5min。

3.用2mLD-PBSA洗涤细胞2次。

4.将1mL底物/染色液加入到每个培养孔内，37℃孵育2h。

5.用2mLD-PBSA液冲洗每孔细胞，在倒置显微镜下观察细胞，计数蓝染（β-gal阳性）细胞。

6.培养板的储存。在每孔加1mL含10%甲醛的缓冲盐溶液，室温下固定10min，然后用缓冲盐溶液洗涤细胞，4℃储存缓冲盐溶液。