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蛋白质染色实验一非氨盐银染法
蚂蚁淘
/发布时间:1533580081 /浏览量:57
| 实验材料 | 蛋白质 试剂、试剂盒 | DTT硝酸银碳酸盐显影液柠檬酸 仪器、耗材 | 摇床
实验步骤 | 1. 将凝胶置于玻璃或聚乙烯容器中，加入100ml固定液，在旋转摇床中缓慢摇动30min。 2. 倾去固定液，将凝胶浸没在脱色液中，缓慢摇动30min。 3. 倾去脱色液，加50ml10%戊二醛，在通风橱中缓慢摇动10min。 4. 倾去戊二醛，用水彻底洗凝胶2h，期间换水几次以保证获得低本底水平。 5. 倾去水，以100mlμg/ml的DTT浸泡凝胶30min。 6. 倾去DTT溶液，不用冲洗，直接加入100ml0.1%硝酸银溶液，缓慢摇动30min。 7. 倾去硝酸银溶液，用小量水快速冼凝胶1次，然后用小量碳酸盐显影液快速洗2次。 8. 将凝胶浸泡在100ml碳酸盐显影液中缓慢摇动，直至获得所需的显色水平。 9. 每100ml碳酸盐显影液中加入2ml2.3mol/l柠檬酸，并缓慢摇动10min以终止染色。 10. 倾去液体，用水冼几次，缓慢摇动30min。 11. 凝胶拍照，凝胶在0.03%碳酸钠中浸泡10min，用塑料保鲜膜包裹或密封于可热密封的袋子中保存。
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