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巴比妥钠缓冲液配置中的注意事项解析
巴比妥钠缓冲液主要是由巴比妥、巴比妥钠、氯化钠等组成,pH值为7.4,常用于血清总补体活性(CH50)测定中制备绵羊红细胞悬液,亦可以用于制备致敏性绵羊红细胞等。
巴比妥钠缓冲液配置操作步骤介绍:
一、绵羊红细胞的制备
1、取绵羊颈静脉血,立即加入等量的抗凝剂,充分混匀。
2、加入适量的1×巴比妥缓冲液,离心,弃上清。
3、重复(步骤2)2次,以便清洗干净。
4、取2ml上述绵羊红细胞溶液,加入98ml1×巴比妥缓冲液,配制成2%的绵羊红细胞悬液。
5、为了使2%的绵羊红细胞悬液标准化,一般吸取0.2ml2%的绵羊红细胞悬液加入1×巴比妥缓冲液。
二、致敏绵羊红细胞的制备
1、用1×巴比妥缓冲液将已知效价的溶血素稀释至2单位。
2、取上述2单位的溶血素、2%的绵羊红细胞悬液等量混合。
3、孵育,并每隔几分钟振摇一次,使绵羊红细胞致敏。
巴比妥钠缓冲液配置注意事项:
1、制备细胞悬液时应根据实验具体需要操作。
2、离心步骤尽量在4℃离心机上操作。
3、稀释成1×巴比妥缓冲液,应尽量在24h内使用。
4、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
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