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2009-07-30【求助】为什么蛋白与上样缓冲液混合后形成沉淀，急！

tqch_3152004
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蛋白质（经硫酸铵和等电点沉淀后用1MKCL复溶）一加2x或6X上样缓冲液就产生沉淀，试问何故？怎样解决？
经搜索发现类似的问题，但人家的裂解液中含盐酸胍，而我的溶液中是不含含盐酸胍啊。
请做蛋白质的行家帮忙解答，谢谢。
*请输入10-500个字符

相关回复

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回复：时间：2009-08-01

你可以试试看，单独把SDS和KCl混起来，看看会发生什么事情这个也是碱法提DNA的原理

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回复：时间：2009-07-30

学习！！！！！！！！！！！！

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回复：时间：2009-08-01

你可以试试看，单独把SDS和KCl混起来，看看会发生什么事情这个也是碱法提DNA的原理不会的，第一次预实验没有出现这种情况。

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回复：时间：2009-08-10

呵呵，并不是你的蛋白沉淀了，而是KCl与SDS发生了反应，另外硫酸铵也一样，如果想要避免这种情况，可以用其他的离子型去垢剂代替LoADIngbuffer中的SDS，不过其必要性不大，因为就算是有沉淀了也同样可以上样，并不影响电泳。

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回复：时间：2009-07-31

呵呵，并不是你的蛋白沉淀了，而是KCl与SDS发生了反应，另外硫酸铵也一样，如果想要避免这种情况，可以用其他的离子型去垢剂代替LoADIngbuffer中的SDS，不过其必要性不大，因为就算是有沉淀了也同样可以上样，并不影响电泳。

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回复：时间：2009-08-05

可是跑电泳是蛋白为什么很少很少了呢？

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回复：时间：2009-08-07

钾和SDS反应形成沉淀，并与蛋白共沉淀，这个是碱法提取DNA的原理，我说的你又不肯信。这个步骤能够沉淀大部分的细菌蛋白，当然你的蛋白也没了。

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回复：时间：2009-08-02

按supermaltose提议，把SDS和KCl混起来，还真看到了沉淀，谢谢楼上各位的建议。

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回复：时间：2009-08-07

k离子浓度过高会对电泳有影响的！

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回复：时间：2009-08-05

这篇文章以前看到下载的，你看一下吧！HOWDOESANSDSPAGEGELREALLYWORK.doc(28.0k)

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回复：时间：2009-07-31

学习了HOWDOESANSDSPAGEGELREALLYWORK.doc(28.0k)，谢谢handsomu。

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回复：时间：2009-08-06

请问下，形成沉淀后可有办法使其溶解？

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回复：时间：2009-08-06

同问，变性后，形成沉淀后可有办法使其溶解？

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