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TEM Visualization of Microtubules
TEMVisualizationofMicrotubules
LEVELII
Materials
- CoatedgridforTEM
- 0.1Mammoniumacetate
- 5%ethanolsaturateduranylacetate
- Transmissionelectronmicroscope
Procedure
- Attheconclusionofa37°CincubationfromExercise9.6,removeonedrop(approximately20microliters)oftheextract,placeitonacollodionorformvarandcarbon-coatedEMgrid,andallowittoremainforabout20-30seconds.6
- Rinsethegridcarefullywith0.1Mammoniumacetate,andfloatthegridupsidedownonadropof5%uranylacetatefor15minutes.Rinsethegridwithwater,blotallexcessfluidsfromthegrid,andallowittoairdry.
- Examinethestainedgridinatransmissionelectronmicroscope.
- Draworphotographyourobservations--calculateallappropriatedimensions(length,diameter)oftheformedtubules.
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