YeastTransformation

• inoculate5-10mlculturewithsinglecolonyandgrowON
• measureOD_600nmanddilutetoOD_600nm=0.3in50ml
• growfor2-4hrs
• spin,washcellswith25mlH₂O
• spin,resUSPendin2ml1xLiAc/0.5xTE
• incubateatRTfor10min
• combineintube:100µlcells,10µlsalmonspermDNA(10mg/ml),upto15µlDNAtobetransformed
• add700µl1xLiAc/1xTE/40%PEGmix
• incubatefor30minat30°C(shakingornotshaking)
• add85µlDMSO
• heatshockat42°Cfor7min
• spin,resuspendcellsin1ml1xTE
• spin,resuspendcellsin0.5ml1xTE
• plate100-200µl/plateandincubateat30°C

Buffers:10xTE:100mMTrispH7.5;10mMEDTA.10xLiAc:1MLiAcinH₂O;sterilefilter.50%PEG3350:50%PEG3350inH₂O;sterilefilter.

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