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2021-08-05流式细胞仪做凋亡检测

火一样
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最近使用流式细胞仪，听到管理仪器的人说流式细胞仪的技术不就是调电压吗？表示很无奈，自己作为新手，很多也都不会，RAW和hela细胞的凋亡检测也不会，raw之前有人帮我调了一下，感觉还好，可是hela细胞就是fsc和ssc的二维图中的点很分散，圈细胞群后（control组不知为啥分两群了，实验组很分散）。用索莱宝的凋亡检测试剂盒检测后，不知为啥图中的细胞形成一条线。实验结果基本没用。现在快失去科研兴趣了，早上五点多起来做实验，晚上也没吃晚饭，哎，，想哭！

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相关回复

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回复：时间：2016-12-02

成一条线 可能是补偿没有调好

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回复：时间：2016-12-01

先用阴性对照调节电压，电压调节准确后才能把阴性核阳性很好的区分开。电压调好后就不要再动。电压调好后再进行后续补偿的调节核样品管的检测。用单染管调补偿。电压调好的标准就是（空白对照或同型对照）阴性群完全出现并处于较低水平（阳性率小于2%）

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回复：时间：2016-11-30

补偿当时调了以后，变化不大。之前做了RAW细胞，分群也不明显，而且PI、AnnexinV双阳性的比例较大。你们有谁做过细菌侵染后关于细胞的凋亡实验吗？显微镜观察感觉细胞数还比较多，检测时数目却很少

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回复：时间：2016-11-26

上网搜一下使用说明

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回复：时间：2016-11-25

使用说明一般试剂盒里面都是有的，5楼一般可以再浏览那些网站呢

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回复：时间：2016-11-25

战友你好，我也是最近开始做流式，遇到了和你一样的问题，我的是FITC/PI双染，通道选的是FL1和FL2，结果也是细胞成一条线，都没有分群，不知你的问题解决了吗？

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回复：时间：2016-11-25

我当时一条线的问题是我选择的PE，后来选择PE（Tx-red）就好了，不过我不知道两者之间有什么区别呢，可能参数选择不对吧

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回复：时间：2016-11-28

细胞凋亡检测推荐汉恒高效AnnexinV/PI凋亡检测试剂盒哦，灵敏度高，操作方便http://www.hanbio.net/cn/products/item/417

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回复：时间：2016-11-26

关于细胞成一条线的原因我也已经解决了。作为一个没人带的实验小白可能这些都是必经的曲折吧。细胞在散点图上为直线，我这边的原因是我没有调节补偿，补偿调节后，结果很正常。回复有点延迟，见谅!

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