DNA文库制备试剂盒
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NO "WEDGE" Sequencing Gels
Ihavebeenusinganalternativetowedgegelsthatsavesacrylamide,cutsgeldryingtimeto20minandgivesasgoodorbetterbandsquashingatthebottomofthegel.ItwaspublishedinBioTechniquesabout3or4yearsago(emailmeifyouwantthereference).
- Themethodgoesassuch:
- Runthegelwith0.5XTBEinthetoptankandnormal1XTBEinthebottomtank.Justafterthelast(orinthecaseofoneload-theonly)loadhasrunintothegel,putahalfvolumeof3Msodiumacetateinthebottomtank(makesureyouleaveenoughroom-Iuse300ml1XTBEand150ml3MNaacetateinmyBRLS2gelbox).
- ThiscausesathemalgrADIentacrossthegel-thebottomisrelativelycoolandthetopgetsquitehottotouch.Thiscausesthebandstoruncloseratthebottom.
- Afewpoints:
- usenormalacrylamidemadein1XTBEandurea.
- thegeltakeshalfaslongagaintorun.
- ifyougoover65-70W,theplatescrack,especiallyoldones.
- Ihaven"ttriednotfixingit,butIseenoproblem.
- Ifixfor20minanddryfor20min.
- Ionlyran3or4wedgegelsbutIcouldn"tstandthedrytimes,buttheresultsappearcomparable-myfriendswhostillrun"emagreewithme.
- Ihopethisisuseful.
- JohnNash(Internet:)Nash@BIOLOGysx.lan.nrc.ca.
- Emailtomyotheraddressesisforwardedautomatically,
- Disclaimer:Allopinionsaremine,notNRC"s!
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