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各位大神,本人小白一枚,最近做镍柱纯化His标签蛋白,做到透析一步,不知道透析液该怎么配,在此请教大家!
我纯化蛋白时用的缓冲液是50mMNaH2PO4,300mMNaCl,pH8.0,洗脱缓冲液在这基础上加咪唑;
现在纯化后想透析掉咪唑,透析液是直接用结合缓冲液,还是PBS缓冲液,或是Tris-Hcl缓冲液?我考虑用结合缓冲液和PBS缓冲液是因为离子成分相近(都有NaH2PO4和NaCl),盐离子环境的变化不大,但是结合缓冲液的盐离子浓度是不是高了?PBS缓冲液pH一般是7.4,pH从8.0到7.4的变化会影响蛋白质稳定性吗?我看也有好些人用Tris-Hcl缓冲液,我也不知道该怎么选择了,各位大神能否给些建议?谢谢啦!
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