- 项目册.doc
- TC Scientific Inc. 产品目录_第1页_Ch...
- 儿童系统性红斑狼疮患者有持续存在的促炎细胞因子环境
- NBUFP10E85, UF CARTRIDGE_价格厂家供...
- 迈瑞黑白B超多少钱?
- 检测多种炎症因子可以用同一个试剂盒?赶快来了解一下吧上海信帆...
- 启迪设计集团股份有限公司
- CellCyclesIntroduction
- 匿名币之前世今生,未来是SERO? 区块链社区 Chai...
- 免疫组化方法检测非小细胞肺癌肺组织中NFκB的表达及意义 道...
- 求真教育_电话_地址 留学服务 洛杉矶华人资讯网
- 细胞因子特点|技术参数|运用领域 上海意杰生物科技有限公司...
- [10-27]细胞因子风暴是什么?细胞因子风暴形成的原因电商信息通
- [10-27]细胞因子检测技术及其应用_鞠佃文
- [04-18]Nature:IGFII在记忆巩固中的关键作用 Labon...
- [10-03]急性胰腺炎促炎细胞因子和抗炎细胞因子的动态变化及其作用 道客...
- [07-30]细胞因子有哪些主要的生物学功能
- [07-25]干细胞之所以具有与普通细胞不一样的特性和相关因子在干细胞的特...
- [07-20]「生长因子」有多坑人,你来看看她的下巴就知道了
- [10-03]细胞因子
- [07-31]遗传三大定律
并指出确定细胞因子的基本指标,
对于一些特殊物质打开思路,
进行反传统定义。
请大家积极发言。
对有用资源做一简单整理
细胞因子PPT之HTML版本
主要的细胞因子
细胞因子
细胞因子
书
网络资源
相关回复
-
已帮助 0人
-
已帮助 0人
-
回复:时间:2006-07-17
1.简单说一下从炎症角度考虑时,观察的指标动物实验模型的制作:肺急性炎症肝炎模型......................................一.表像的炎症的判断指标:红 肿 热 痛 机能障碍二.镜下观察:1.migration of the inflammation;2.hemorrhage3.destruction of the cell walls;4.炎性细胞的浸润5.水肿………………………………………..三.细胞分子水平1. 运用ELISA的方法检测大鼠血清多种炎症性因子的水平,如IL-1,IL-6,TNF-B,CRP等.2. 免疫组织化学的方法检测动脉组织中中性粒细胞,单核细胞的量,以及蛋白质的表达情况等,3. 用单克隆抗体进行检测,或是荧光原位杂交进行检测亦可! RT-PCR和western blotting 检测多种炎性蛋白的表达情况,可以定量,如黏附分子,CD分子, C反应蛋白CRP等.2.趋化性的研究(具体待)3.一种物质的刺激性分泌(动态检测)(爆发性量)4.得知受体后的反推倒理论。
-
已帮助 0人
-
回复:时间:2006-07-18
感谢初恋的雪在下战友的帖子。。。。也衷心希望大家进行补充讨论。作为免疫效应分子的细胞因子,在免疫系统的分化、发育、成熟以及免疫调控中占有重要地位 。希望战友就该话题展开讨论,以增进大家对细胞因子的深入认识和理解。。。。
-
已帮助 0人
-
已帮助 0人
-
回复:时间:2006-07-08
可不可以先掉出基因做序列比较先归归类看是不是已存在的某个细胞因子家族的成员如果是的话再相应的做相关的功能上的验证实验好象考试的时候考过这道题不记得当时老师给的答案了
-
已帮助 0人
-
回复:时间:2006-07-19
对楼主的话题比较感兴趣,也来谈谈浅薄的认识:一 细胞因子检测:1生物学活性法细胞因子依赖细胞的增殖实验细胞毒实验集落形成法病毒抑制实验趋化实验等2分子杂交、RT-PCR、细胞因子microarray3免疫学测定法ELISAELISPOT细胞内的细胞因子检测。二 从人类基因组发现新细胞因子由于体内含量较高的细胞因子大部分已被克隆化,传统的路线已经难以发现新免疫分子。目前的新细胞因子克隆化策略主要利用反向生物学原理,从人类基因组发现新细胞因子或其受体编码基因。1传统生物学策略发现生物活性-鉴定细胞因子蛋白-克隆基因-细胞表型-动物模型-人体内功能及与疾病关联2反向生物学策略数据库DNA序列 -生物信息学-蛋白质表达-细胞表型-动物模型-人体内功能及与疾病关联。
-
已帮助 0人
-
回复:时间:2006-07-10
我搜集了一些细胞因子相关网站,贴出来大家分享细胞因子百科全书http://www.copewithcytokines.de/cope.cgi细胞因子序列数据库http://cytokine.medic.kumamoto-u.ac.jp/国际细胞因子学会http://bioinformatics.weizmann.ac.il/cytokine细胞因子综述http://cytokine.rndsystems.com/asp/b_index.asp细胞因子SNPhttp://bris.ac.uk/pathandmicro/services/GAI/cytokine4.htm另外,细胞因子的药物性研发应用也越来越热主要集中在以下几个方面1。重组细胞因子药物2。重组可溶性细胞因子受体药物2。以细胞因子为药物靶标的小分子药物3。抗细胞因子或其受体的中和抗体4。细胞因子基因治疗5,细胞因子免疫毒素或导向药物其中已经批准上市的有IFNα毛细胞白血病、肝炎、 Kaposi肉瘤 IFNγ类风湿关节炎、慢性肉芽肿、生殖器疣 G-CSF自身骨髓移植、化疗导致的粒细胞减少症、 再生障碍性贫血 GM-CSF 自身骨髓移植、化疗导致的血细胞减少症、 再生障碍性贫血 Epo慢性肾衰导致贫血、癌症或癌症化疗导致的贫血、失血后贫血 IL-2癌症、免疫缺陷 IFNβ多发性硬化症 IL-11放化疗所致血小板减少症 SCF与G-CSF联合应用与外周血干细胞移植EGF外用药治疗烧伤、溃疡(国内批准上市)bFGF外用药治疗烧伤、外周神经炎(国内批准上市) 突变体TNF晚期肿瘤(国内批准上市) TPO放化疗所致血小板减少症(国内批准上市个人认为细胞因子相关的基础和临床应用研究前景十分广阔,从事相关工作是很有前途的。
-
已帮助 0人
-
回复:时间:2006-07-12
细胞因子(cytokine)是细胞分泌的具有生物活性的小分子蛋白质的统称.在很多情况下,多种免疫细胞间的相互作用是通过细胞因子介导完成的.从不同的角度,细胞因子有多种名称.如单核一巨噬细胞产生的因子称为单核因子.由淋巴细胞产生的细胞因子称为淋巴因子(如:白细胞介素,干扰素和肿瘤坏死因子等).可刺激骨髓干细胞或祖细胞分化成熟的细胞因子称为集落刺激因子(CSF).由于重组细胞因子问世,已开始应用细胞因子调节机体免疫而治疗某些疾病.众多的细胞因子有以下共同的作用特点。 (1)绝大多数细胞因子为分子量小于25kDa的糖蛋白,分子量低者如IL-8仅8kDa。多数细胞因子以单体形式存在,少数细胞因子如IL-5、IL-12、M-CSF和TGF-β等以双体形式发挥生物学作用。大多数编码细胞因子的基因为单拷贝基因(IFN-α除外),并由4~5个外显子和3~4个内含子组成。 (2)主要与调节机体的免疫应答、造血功能和炎症反应有关。 (3)通常以旁分泌(paracrine)或自分泌(autocrine)形式作用于附近细胞或细胞因子产生细胞本身。在生理状态下,绝大多数细胞因子只有产生的局部起作用。 (4)高效能作用,一般在pM(10-12M)水平即有明显的生物学作用。 (5)存在于细胞表面的相应高亲和性受体数量不多,在10~10000/每个细胞。近年来,细胞因子受体的研究进展相当迅速,根据细胞因子受体基因DNA序列以及受体胞膜外区氨基酸序列、同源性和结构,可分为四个类型:免疫球蛋白超家族、造血因子受体超家族、神经生长因子受体超家族和趋化因子受体。 (6)多种细胞产生,一种IL可由许多种不同的细胞在不同条件下产生,如IL-1除单核细胞、巨噬细胞或巨噬细胞系产生外,B细胞、NK细胞、成纤维细胞、内皮细胞、表皮细胞等在某些条件下均可合成和分泌IL-1。 (7)多重的调节作用(multiple regulatory action),细胞因子不同的调节作用与其本身浓度、作用靶细胞的类型以及同时存在的其它细胞因子种类有关。有时动物种属不一,相同的细胞因子的生物学作用可有较大的差异,如人IL-5主要作用于嗜酸性粒细胞,而鼠IL-5还可作用于B细胞。 (8)重叠的免疫调节作用(overlapping regulatory action),如 IL-2、IL-4、IL-9和IL-12都能维持和促进T淋巴细胞的增殖。 (9)以网络形式发挥作用,细胞因子的网络作用主要是通过以下三种方式:(1)一种细胞因子诱导或抑制另一种细胞因子的产生,如IL-1和TGF-β分别促进或抑制T细胞IL-2的产生;(2)调节同一种细胞因子受体的表达,如高剂量IL-2可诱导NK细胞表达高亲和力IL-2受体;(3)诱导或抑制其它细胞因子受体的表达,如TGF-β可降低T细胞IL-2受体的数量,而IL-6和IFN-γ可促进T细胞IL-2受体的表达。 (10)与激素、神经肽、神经递质共同组成了细胞间信号分子系统。理化特性和分泌特点1.理化特性:绝大多数细胞因子是低分子量蛋白质或糖蛋白,多数以单体形式存在。IL-10、IL-12、M-CSF等可以双体形式存在,TNF-β为三聚体。2.分泌特点:细胞因子可以自分泌、旁分泌和内分泌的方式发挥作用。(1)自分泌:指产生细胞因子的细胞同时也是该细胞因子作用的靶细胞。如IL-2,由活化T细胞和NK细胞产生,又可诱导活化T细胞增殖分化和增强NK细胞的杀伤活性。(2)旁分泌:指一种细胞产生的细胞因子作用于邻近细胞。如巨噬细胞向T细胞提呈抗原时分泌的IL-1可诱导T细胞活化。(3)内分泌:指一种细胞产生的细胞因子可作用于远处细胞。如高剂量的IL-1、TGF-β和M-CSF。来源和产生特点1.来源:细胞因子的来源具有多源性,即体内多种细胞可产生细胞因子,归纳为三类:(1)活化的免疫细胞:T、B淋巴细胞、NK细胞、单核吞噬细胞、粒细胞、肥大细胞等。(2)基质细胞:血管内皮细胞、成纤维细胞、上皮细胞和中枢神经系统的小胶质细胞等。(3)某些肿瘤细胞:如骨髓瘤细胞、宫颈癌细胞和白血病细胞系等。2.产生特点:细胞因子的产生具有多向性,即接受某种抗原或有丝分裂原刺激后,一种细胞可分泌多种细胞因子,而不同类型的细胞可产生相同的细胞因子。如活化TH细胞可产生IL-2 、IL-4、 IL-10等多种白细胞介素;而白细胞、成纤维细胞、活化T细胞均可以产生IFN。作用特点1.非特异性:细胞因子虽然也是细胞受抗原或丝裂原刺激后产生的,但与抗体不同的是,细胞因子对靶细胞的作用不受抗原特异性的限制,也不受MHC限制。2.多效性:即一种细胞因子可对多种靶细胞作用,产生多种生物学效应。3.重叠性:即几种不同的细胞因子可对同一种靶细胞产生相同或相似的生物学效应。4.网络性:即各种细胞因子的作用是互相影响的。这种影响通过合成分泌的相互调节、受体表达的相互控制、生物学效应的拮抗、协同作用来实现,形成十分复杂的网络。5.高效性:即细胞因子对相应受体具有很高的亲和力,微量细胞因子即能产生明显的生物学效应。
-
已帮助 0人
-
已帮助 0人
-
回复:时间:2006-07-09
个人理解,细胞因子不仅使细胞分泌的小分子多肽,更重要的是,他们具有很重要的信号转到功能。在炎症反应,免疫应答,细胞代谢和生命周期调控中有着网络性的作用。并且这种物质的种属特异性不是很强,同一种细胞因子在不同物种间的作用相似,人工合成的该种物质同样具有类似的生物学活性
-
已帮助 0人
-
已帮助 0人
-
回复:时间:2006-07-18
(1)多种细胞因子(IL-2.IL-6)在体外实验中可刺激其依赖株细胞增生.以H-胸腺嘧啶核苷参入法做细胞增生实验就可判定这些细胞因子的生物学活性. (2)利用某些细胞因子的功能特点也可检测其生物学活性.例如,利用干扰素可保护L929细胞免受水泡性口炎病毒的破坏的性质可检测干扰素的生物学活性.利用TNF杀伤L929细胞的特点检测TNF的生物学活性.(3)采用ELISA法,用细胞因子的特异性抗体可对各种细胞因子进行定量测定. (4)采用反转录DNA聚合酶链反应(PCR)的方法,可测定待检细胞中细胞因子特异性mRNA的表达.
-
已帮助 0人
-
回复:时间:2006-07-15
能否根据作用特点来判断是否为细胞因子:1.细胞因子通常以非特异的方式发挥作用,即细胞因子对靶细胞的作用无抗原特异性,也不受MHC的限制2.细胞因子与相应的受体结合具有很高的亲和力,只需要极少量就可以产生明显的生物学效应,即具有高效性3.一种细胞因子可对多种靶细胞作用,产生多种不同生物学效应,即具有多效性;几种不同的细胞因子也可对同一种靶细胞作用,产生相同或相似的生物学效应,即具有重叠效应.4.细胞因子间可通过合成分泌的相互调节,受体表达的相互调控,生物学效应的相互影响组成细胞因子网络.表现为相互诱生,功能叠加,协同或拮抗.
-
已帮助 0人
-
回复:时间:2006-07-19
是否为细胞因子,我觉得没有讨论的必要。只要确定是由某种细胞分泌的,小分子物质,都可以叫细胞因子,至于动能嘛,很难说,也许一个小分子发现很久了但是功能还是没有完全弄清楚。没有必要把一个东西很快定性。随着研究的深入自然在结构和功能学上有分类的
-
已帮助 0人
-
回复:时间:2006-07-15
有一个特别的细胞因子TNF-α它可以以Ⅱ型跨膜受体形式存在,但被一种金属蛋白酶裂解其细胞外近膜端后就会脱落成为细胞因子这是不是也说明有些细胞因子和其他的形式之间存在某些转化机制另外提出一个问题补体的小片段也有细胞因子的活性比如C3a、C5a等它们是不是也可以归为细胞因子呢?
-
已帮助 0人
-
已帮助 0人
-
已帮助 0人
-
回复:时间:2006-07-09
其实现在许多概念都已经滞后于前言的科学研究,就向趋化因子的概念一样,传统的结构模式已经逐渐被打破。出现新类型的趋化因子。例如HMGB1, ,IL-6,MIF被证实具有一定的趋化活性,研究人员把他们命名为非经典趋化因子(chemokine-like functions)。细胞因子更是种类繁多,新物质或物质的新功能如日新月异地被发现。像楼上战友提到的补体的小片段也有细胞因子的活性。传统的定义方式已经不能满足现在科学研究的发展。再就是教条样式的教科书在许多问题过于僵化。
-
已帮助 0人
-
已帮助 0人
-
已帮助 0人
-
已帮助 0人
-
回复:时间:2006-07-15
以上各位的讨论我认为都是很透彻的,但是对于如何发现新的细胞因子的方法,说得不太具体。 细胞因子一般来说都是分泌性的蛋白或者修饰过的蛋白复合物,我们的目的就是发现这类新的物质的存在,并且进一步鉴定结构、发源,并且对其功能作用作研究。 在当前的技术手段和实验室平台的巨大发展下,我以为,首先应当用大规模筛选的方法,然后对于所得结果进一步用一般实验方法单个鉴定。 建议的方案有两条:第一,针对细胞外液,体液,采用富集蛋白,二维电泳的方式进行筛选,对于新发现者进行重复试验,并且进一步单个鉴定;第二,对于作用于细胞自身的细胞因子,可以采用生物信息学的方法,设计出蛋白和糖无序列,采用细胞芯片的方式进行筛选(在此本人认为液相芯片要优于固相芯片),对于所得结果进一步单个鉴定。 此为一管之见,请各位不吝指教
-
已帮助 0人
-
已帮助 0人
-
回复:时间:2006-07-15
细胞因子是由细胞分泌的,具有介导和调节免疫,炎症和造血过程的小分子蛋白质.他们的共同特点为:1,为分泌到细胞外的小分子蛋白质;2.在接受抗原和丝裂原等刺激后合成释放;3,生物半衰期和发挥作用的时间较短;4,多在细胞间发挥短距离作用;5,很低水平就表现生物学活性;6通过结合细胞表面的相应受体发挥生物学作用.
-
已帮助 0人
-
已帮助 0人
-
已帮助 0人
-
回复:时间:2006-07-10
我想很难一下就确定出是细胞因子来,因为楼主提的这个问题范围太广了,具体概念性的如下:为了维持机体的生理平衡,抵抗病原微生物的侵袭,防止肿瘤发生,机体的许多细胞,特别是免疫细胞合成和分泌许多种微量的多肽类因子。它们在细胞之间传递信息,调节细胞的生理过程,提高机体的免疫力,在异常情况下也有可能引起发烧、炎症、休克等病理过程。这样一大类因子已发现的有上百种,统称为细胞因子,包括淋巴细胞产生的淋巴因子、单核细胞产生的单核因子、各种生长因子等。许多细胞因子是根据它们的功能命名的,如白细胞介素(IL)、干扰素(IFN)、集落刺激因子(CSF)、肿瘤坏死因子(TNF)、红细胞生成素(EPO)等。细胞因子研究具有非常重要的理论和实用意义,它有助于阐明分子水平的免疫调节机理,有助于疾病的预防、诊断和治疗,特别是利用基因工程技术生产的重组细胞因子已用于治疗肿瘤、感染、炎症、造血功能障碍等,并收到良好疗效,具有非常广阔的应用前景。从分子结构来看,细胞因子都是小分子的多肽,多数由100个左右氨基酸组成。细胞因子都是通过与靶细胞表面的细胞因子受体特异结合后才能发挥其生物学效应,这些效应包括促进靶细胞的增殖和分化,增强抗感染和杀肿瘤细胞效应,促进或抑制其他细胞因子的合成,促进炎症过程,影响细胞代谢等。细胞因子的这些作用具有网络性的特点,即每种细胞因子可作用于多种细胞;每种细胞可受多种细胞因子的调节;不同细胞因子之间具有相互协同或相互制约的作用,由此构成了复杂的细胞因子免疫调节网络。目前人们对这一网络的认识尚远未清晰明了。最近几年,基因重组的细胞因子作为一种新型的生物应答调节剂在临床应用上取得了令人瞩目的成就。例如,最早用于临床的干扰素α在治疗白血病和病毒感染中收到显著疗效。中国的干扰素a1在1991年通过新药审评,已得到较为广泛的应用。目前在国际上已批准生产的细胞因子药物还包括EPO、干扰素γ、GM-CSF、G-CSF、IL-2等。由于细胞因子为人体自身成分,通过调节机体生理过程和提高免疫力来治疗疾病,在低剂量即可发挥作用,因而疗效显著,副作用小是一种全新的生物疗法,将会很快获得突飞猛进的发展。细胞因子:一类非抗体蛋白质的统称。此种蛋白质由一个细胞群(如已活化的T淋巴细胞)与特异性抗原接触后所释放。如淋巴活素.细胞因子的研究渊源始于50年代的干扰素研究和60年代的集落刺激因子研究,由于基因工程技术的迅速发展,使细胞因子研究发生了突破性的进展。在80--90年代相继克隆出一大批细胞因子,细胞因子的化学本质是多肽,从信息传递的角度,细胞因子是生物体内一类重要的第一信使分子,是细胞内基因表达的产物。在自然状态下,细胞因子受体 (cytokine receptor, CK-R)主要以膜结合细胞因子受体 (membrane-bound cytokine receptor, mCK-R) 和存在于血清等体液中可溶性细胞因子受体 (soluble cytokine receptor, sCK-R)两种形式存在。 细胞因子复杂的生物学活性主要是通过其与相应的mCK-R结合后所介导的,而sCK-R却具有独特的生物学意义。近年来, sCK-R水平变化与某些疾病的关系日益受到学者们的重视。部分重组sCK-R(rsCK-R) 基因工程产品已进入临床验证,关于sCK-R的产生机理, 结构特点及其免疫学功能等方面的基础研究也取得了长足的进展。研究表明,体内的各种细胞因子之间并不是孤立存在的,而是有着复杂的相互作用,它们之间通过合成和分泌的相互调节,受体表达的相互调节、生物学效应的相互影响等组成一个复杂的细胞因子互作网络。
-
已帮助 0人
-
回复:时间:2006-07-15
我想若已知一种细胞因子,可以试着去检测它,检测它的方法很多(如下),但是若要是检测它是不是细胞因子,就很难说了吧:(细胞因子均在机体的免疫调节、炎症应答、肿瘤转移等生理和病理过程中起重要作用。检测这类因子不仅是基础免疫研究的有较手段,亦是临床上探索疾病发病机制、判断预后和考核疗效的指标。.细胞因子检测概述检测细胞因子的方法主要有生物学检测法、免疫学检测法和分子生物学检测法。一、生物学检测法生物学检测又称生物活性检测,是根据细胞因子特定的生物活性而设计的检测法。由于各种细胞因子具有不同的活性,例如il-2促进淋巴细胞增殖,tnf杀伤肿瘤细胞,csf刺激造血细胞集落形成,ifn保护细胞免受病毒攻击,因此选择某一细胞因子独特的生物活性,即可对其进行检测。生物活性检测法又可分为以下几类:1.细胞增殖法许多细胞因子具有细胞生长因子活性,特别是白细胞介素,如il-2刺激t细胞生长、il-3刺激肥大细胞生长、il-6刺激浆细胞生长等。利用这一特性,现已筛选出一些对特定细胞因子起反应的细胞,并建立了只依赖于某种因子的细胞系,即依赖细胞株(简称依赖株)。这些依赖株在通常情况下不能存活,只有在加入特定因子后才能增殖。例如il-2依赖株ctll-2在不含il-2的培养基中很快死亡,而加入il-2后则可右体外长期培养。在一定浓度范围内,细胞增殖与il-2量呈正比,因此通过测定细胞增殖情况(如使用3h-tdr掺入法、mtt法等)鉴定il-2的含量。除依赖株外,还有一些短期培养的细胞,如胸腺细胞、骨髓细胞、促有丝分裂原刺激后的淋巴母细胞等,均可作为靶细胞来测定某种细胞因子活性。2.靶细胞杀伤法是根据某些细胞因子(如tnf)能在体外杀伤靶细胞而设计的检测方法。通常靶细胞多选择体外长期传代的肿瘤细胞株,利用同位素释放法或染料染色等方法判定细胞的杀伤率。3.细胞因子诱导的产物分析法某些细胞因子可刺激特定细胞产生生物活性物质,如il-2、il-3诱导骨髓细胞合成胺、il-6诱导肝细胞合成α1-抗糜蛋白酶等。通过测定所诱生的相应产物,可反映细胞因子的活性。4.细胞病变抑制法病毒可造成靶细胞的损伤,干扰素等则可抑制病毒所导致的细胞病变,因此可利用细胞病变抑制法检测这类因子。二、免疫学检测法细胞因子均为蛋白或多肽,具有较强的抗原性。随着重组细胞因子的出现,可较方便地获得细胞因子的特异性抗血清或单克隆抗体,因此可利用抗原抗体特异性反应的特性,用免疫学技术定量检测细胞因子。尽管细胞因子种类繁多,只要获得了针对某一因子的特异性抗体(包括多克隆抗体或单克隆抗体)均可采用相似的技术开展工作。常用的方法包括elisa、ria及免疫印迹法。目前,几乎所有常见细胞因子的检测试剂盒均有商品供应。此外还可利用酶标或荧光标记的抗细胞因子单克隆抗体,原位检测因子在细胞内的合成及分布情况。免疫学检测法可直接测定样品中特定细胞因子的含量(用ng/ml表示),为大规模检测临床病人血清中细胞因子的含量提供了方便。本法仅测定细胞因子的抗原性,与该因子活性不一定相平行,因此要了解细胞因子的生物学效应,必须结合生物学检测法。三、分子生物学方法这是一类利用细胞因子的基因探针检测特定细胞因子基因表达的技术。目前所有公认的细胞因子的基因均已克隆化,故能较容易地得到某一细胞因子的cdna探针或根据已知的核苷酸序列人工合成寡聚核苷酸探针。利用基因探针检测细胞因子mrna表达的方法多种多样,常使用斑点杂交、northernblot、逆转录pcr,细胞或组织原位杂交等。实验的关键在于制备高质量的核酸探针和获得合格的待测物(提取的mrna样品或细胞/组织标本)。核酸探针是指一段用放射性同位素或其他标记物(如生物素、地高辛等)标记并与目的基因互补的dna片段或单链dna、rna。根据其来源可分为cdna探针、寡核核苷酸探针、基因组基因探针及dna探针等。其中cdna探针和人工合成寡核苷酸探针常用于斑点杂交及northernblot,而rna探针因穿透性好更适用于原位杂交。核酸探针技术的应用已经程序化,以cdna探针为例主要包括:①质粒dna的提取;②靶dna片段的分离;③靶dna片段标记;④待测样品mrna的提取;⑤标记cdna探针对待检样品的杂交;⑥放射自显影或显色分析。近年来出现的rt-pcr检测特异性mrna的方法也广泛用于细胞因子研究领域。该法具有灵敏、快速等优点,甚至从1~10个细胞中就可检出其中的特异mrna。上述三种方法,各有优缺点,可互相弥补,在实际应用中,呆根据各自的实验目的和实验室条件进行选择。生物学检测法比较敏感,又可直接测定生物学功能,是最可靠的方法,适用于各种实验目的,是科研部门最常用的技术,但需要长期培养依赖性细胞株,检测耗时长,步骤繁杂,影响因素多,不容易熟练掌握。免疫学检测法比较简单,迅速,重复性好,但所测定的只代表相应细胞因子的量而不代表活性,同时敏感度也低生物活性检测法(约低10~100倍)。分子生物学法只能检测基因表达情况,不能直接提供有关因子的浓度及活性等资料,主要用于机制探讨。
-
已帮助 0人
-
已帮助 0人
-
回复:时间:2006-07-15
没那么复杂吧,哥们!只要是细胞产生的小分子活性物质,都是细胞因子。如何鉴定?只要你发现了他的确定生物学活性,具体起什么作用,然后能在分泌该生物活性物质的的细胞的基因组里找到相应的基因片段就是强有力的证据了!最关键的是,如果能纯化该细胞因子,做一个质谱,测其氨基酸序列,反推可能的DNA序列,然后再GenBank一BLAST就有线索了
-
已帮助 0人
-
已帮助 0人
-
已帮助 0人
-
回复:时间:2006-07-11
我最近详细看了一下最新确认的细胞因子IL-32和IL-33的文献。我自己在做基因功能方面的课题。书本的知识太笼统,我想可以结合基因和细胞生物学方面谈谈什么是细胞因子的看法。比如有一个基因您认为可能是细胞因子,那么您的入手点在哪里呢?首先细胞因子是分泌的。有可能是有信号肽也有可能是通过非经典途径分泌出来的,如依赖caspase1的IL-1beta,IL-18,IL-33。细胞传导通路上的特点:如激活NF-kappaB,MAPK,NF-AT通路。对已知细胞因子的影响。细胞因子见可以相互影响其表达量,因此可以检测已知细胞因子的量或者使用已知细胞因子来刺激检测未知细胞因子的表达量。极低量即可发挥功能。一般原核表达蛋白质即可发挥作用。表达谱:一般大多在免疫细胞中表达。受体:细胞因子发挥作用通过受体发挥作用,除非属于已知细胞因子家族,否则比较难以确认。可以采用蛋白质相互作用等方法发现。应该还有一些,等待大家补充。
-
已帮助 0人
- 1509073173细胞因子风暴是什么?细胞因子风暴形成的原因电商信息通
- 1509073173细胞因子检测技术及其应用_鞠佃文
- 1303115340Nature:IGFII在记忆巩固中的关键作用 Labon...
- 1506972693急性胰腺炎促炎细胞因子和抗炎细胞因子的动态变化及其作用 道客...
- 1627581602细胞因子有哪些主要的生物学功能
- 1627149603干细胞之所以具有与普通细胞不一样的特性和相关因子在干细胞的特...
- 1626717602「生长因子」有多坑人,你来看看她的下巴就知道了
- 1506972690细胞因子
- 1627668002遗传三大定律
- 1509073173对于细胞因子,你都了解多少?
- 1506972693()是“细胞因子工厂”_
- 1627236002【求助】请教通过何种方法检测细胞因子,如何知道细胞因子存在于...