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Embedding in Resins for Immunocytochemistry
BIOLOGicalspecimensareembeddedinresinsothattheycanbethinsectioned.Manydifferentresinformulasarecurrentlyavailableandallhavebeenusedforpost-embeddinglabeling(i.e.whereantibodiesareappliedtothinsectionsofthetissue)withvariableresults.Specializedresinformulashavebeendevelopedspecificallyforuseinimmunocytochemistry.TheseincludetheLowicrylresins,LRWhiteandLRGold,UnicrylandMonoStep.Theyallhavelowviscosityandcanbepolymerized,atlowtemperatures,withultraviolet(UV)light.
Themostcommonembeddingprotocolfortheseresinsiscalledtheprogressiveloweringoftemperature(PLT)methodwherethesampleisprogressivelycooledduringthedehydrationsteps.Thespecimensarethentransferredtoresinandtheblocksarepolymerized,atlowtemperature,byexposuretoUVlight.
Analternativemethodforembeddingspecimensintheseresinsisbyfreezesubstitution.Thismethodconsistsoffreezingthespecimenandthensubstitutingthefrozenwaterinthespecimenwithaliquidsolvent.Followthefollowinglinksformoredetailsonthetheoryoffreezesubstitutionandforasimpleprotocoloffreezesubstitution
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