细胞分离

内皮细胞损伤模型

一、细胞因子损伤模型将内皮细胞铺板后待即将单层融合时,换无血清或低血清培养基,加入细胞因子如IL-2,TNF-alpha、IFN等,共同孵育一段时间,或者加入药物与之共孵育,或者加细胞因子之前先加入药物孵育后,再加细胞因子,结束后测一些指标如MTT、LDH、NO、等等看药物对细胞因子损伤的保护作用。也可采用不同的时间、不同的浓度来观察。二、缺氧-再供氧损伤模型也是先将内皮细胞铺板后待即将单层融合时,换无血清或低血清培养基,先将细胞置于95%N2和5%的CO2的混合气的缺氧槽环境中注意保持37度的温度,用耗氧仪持续监测缺氧槽中的氧分压,使之保持在0.5KP左右,细胞在低氧环境中培养一段时间后在移入正常的培养环境,可观察不同的缺氧时间、不同的给氧时间对内皮细胞形态功能的影响,也可结合药物观察,入上所述。此外,内皮细胞的损伤模型尚有双氧水损伤模型、氧自由基损伤模型、氧化型脂蛋白损伤模型、等等。最后提及一点,楼上说的ox-LDL损伤模型的浓度不是很准确,因为从目前国内外的文献来看,oxLDL(10-50ug/ml)的浓度一般不会损伤内皮细胞尤其是内皮细胞系,如ECV304,恰恰相反,的浓度的ox-LDL会促进细胞的增值,国内有人报道,ox-LDL造成ECV304凋亡的浓度一般为150ug/ml~200ug/ml,也有用100g/ml的。

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