细胞分离

几种休克动物模型得建立

1.Hypovolemicshock(MODSMultipleorgandysfunctionsyndrome):低血容量性休克模型Wistar大鼠,4.5%异戊巴比妥(80mg/kg)?在25℃室温下腹腔内给药麻醉?,右股动脉插入套管针,连接多导生理记录仪,监测血压;左颈静脉插入套管针给予甘氨酸、生理盐水和自体血(复苏通路);右颈动脉插入套管针,另一端连接肝素化玻璃注射器中,进行放血诱导休克(休克模型建立)在5min内使血压下降并维持平均动脉压30~35mmHg。通过输、抽少量血维持低血压状态55min。低血压60min后用60%自体血回输5min和2倍回输血量的生理盐水回输55min进行复苏。(出血性休克基础上,通过复苏引发缺血-再灌注损伤模拟MODS)2.Septicshock:感染性休克Wistar大鼠,随机分为正常对照组(n=6),大剂量(LPS10mg/kg)内毒素组(n=9),小剂量(LPS5mg/kg)内毒素组(n=9),对照组注射生理盐水4ml/kg。戊巴比妥钠(36mg/kg)腹腔注射麻醉,行右侧股动脉插管,连接四导生理记录仪监测平均动脉压(meanarterialpressure,MAP),四肢插皮下电极连接生理记录仪描记心电图并记录心率变化。左侧股静脉注射LPS(注射时间5min),注射LPS前,注射LPS后30,60,90min,2,3,4,6h自左侧股动脉插管采血0.5ml,采血后补等量生理盐水以保证血容量,高速低温离心机3000r/min离心15min,吸取上清保存于-70e冰箱中(TNF测定)感染性休克目前公认的动物模型有内毒素诱导、细菌注射、腹膜炎模型即盲肠结扎穿孔模型。内毒素诱导模型具有制模方便、快捷、模型稳定、易于评定等优点,而且动物的血流动力学改变与内毒素的剂量直接相关3.Cardiogenicshock:(结扎犬冠状动脉左前降支(LAD)复制心源性休克模型)健康成年杂种犬20只,以戊巴比妥钠30mg·kg-1静脉注射麻醉后,背位固定,切开颈部皮肤,分离气管后插入插管,连接人工呼吸机。分离右侧颈总动脉,插管,连接AP-601G放大器,测定血压(BP)。于左侧第四肋间施开胸术暴露心脏,剪开心包,做心包术。分离主动脉根部,放置电磁流量计探头,测量主动脉流量(CO)。于冠状动脉左前降支末梢、中部、根部下方,分别用小圆针穿入细丝线,以备结扎。上述手术完成后,稳定15~30min,10mi顺次结扎冠状动脉左前降支末梢、中部、根部,待平均动脉压(MAP)下降至原血压的70%以下,CO减少30%以下者视为休克。如达不到休克指标,再结扎冠脉左回旋支第1、2分支。心源性休克模型复制时间为(124.49±18.42)min,持续观察10min,如血压不回升者进行给药观察。4.Allergicshock:过敏性休克健康小白鼠,(变应原)采用鸡蛋清或天花粉8mg/ml并加入等量的氢氧化铝凝胶,氢氧化铝凝胶作为佐剂。第1日致敏注射:1:2稀释鸡蛋清,佐剂,皮下注射0.2ml第15日发敏注射:1:2稀释鸡蛋血清,静脉注射0.5ml小白鼠发敏注射半分钟至数分钟后即出现呼吸急促,抓鼻,不安,耸毛,弓背,继而出现紫绀,呼吸困难,分钟后逐渐精神萎靡,平衡失调,大小便失禁甚至死亡。但多数小白鼠可在半小时后逐渐恢复正常.

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