Mutagenizingayeastgenewithamini-transposon

First,clonegeneintovectorpHSS6.Then:

1. Day1:Transformplasmidintobacteriaexpressingtransposase.
2. Day2:MatetransformantstobacteriacarryingmTn(Matingmeansmixingthecellsandplatingwithselection).
3. Day3:Scrapeoffcellsandmatetobacteriacarryingresolvase.
4. Day4:Scrapeoffcells,makeaminiprepandtransformintoE.coli.
5. Day5:Scrapeofftransformants,makeaminiprep,cutwithNotI.
6. Day6:Transformdigestintoyeast.

It"sjustthatsimple.

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