293无血清培养基描述：

BalanceCD293培养基适用于悬浮培养条件下的HEK293细胞（如293-F,293-T,Expi-293F

等）的高密度生长和瞬时转染表达。BalanceCD293培养基含有细胞生长所需的全部营养成份，无需添加任何添加物即可使用。（注意：此培养基不包含抗生素以及血清）

293无血清培养基特点:

瞬时转染专用培养基，适用于HEK293细胞高密度悬浮培养

无蛋白、无动物源、化学成分限定

即用型完全培养基,无需添加额外成分

以上为293无血清培养基使用之细胞复苏的方法，如需了解更多请联系徕创生物！

产品使用方法：

细胞驯化

1）直接驯化

大部分情况下，培养于其他培养基中的细胞，可以直接适应BalanceCD293medium，只要按照日常传代方式（稀释）更换培养基即可。

2）渐进式驯化

注意：选用低代次、处于对数生长期的细胞进行驯化

①在原培养基中复苏细胞并继续使用该培养基传代2到3次至细胞生长稳定，当细胞密度达到2x106cells/ml后进行传代，传代细胞密度控制在0.5-0.6×10⁶cells/mL，5-10%血清的传统培养基或其他无血清培养基与BalanceCD293培养基的比例为75:25；

②将细胞置于37℃，5%CO2，转速为110-175rpm的恒温摇床中进行培养；

③当细胞密度3-4天后达到3x10⁶cells/ml且细胞活率>90%，传代时5-10%血清的传统培养基或其他无血清培养基与BalanceCD293培养基的比例为50:50，细胞密度控制在0.5×10⁶cells/mL。如细胞生长慢，可离心上清，留20%条件培养基，加入80%的5-10%血清的传统培养基或其他无血清培养基与BalanceCD293培养基比例为75:25的混合培养基，继续培养；

④重复步骤③逐步增加BalanceCD293培养基所占的比例(5-10%血清的传统培养基或其他无血清培养基与BalanceCD293培养基的比例为25:75至10:90）直到100%的BalanceCD293培养基；

⑤经过在100%的BalanceCD293培养基中的几次传代培养，传代后3-4天细胞的密度可以达到2-3×10⁶cells/mL，细胞活率大于90%，这说明细胞已经完全适应了BalanceCD293培养基。之后进行细胞的传代培养时，细胞的起始密度可以降到0.3×10⁶cells/mL，一般传代2-3次后再进行转染实验。

注意:一般细胞驯化过程中，前三代细胞的状态可能不是很好，但一般从第四代状态会有改善。

细胞传代

1）取细胞培养样品，人工或仪器测定细胞密度以及活率；

2）计算传代所需的细胞用量，建议起始细胞密度为0.2-0.4×10⁶cells/mL。建议复苏的细胞至少培养两代后再用于其他用途。传代培养体积建议为15-20mL（100mL的培养瓶）或50-60mL（250mL的培养瓶）；

3）将细胞置于37℃，5%CO2，转速为110-175rpm的恒温摇床中进行培养，3-4天传代一次。

细胞转染在BalanceCD293培养基中，采用商业化转染试剂（例如Gibco293Fectin™ExpiFectamine™293TransfectionKit）或PEI可以实现对HEK293细胞的高效转染。