培养基

细胞表面抗原染色的组织样本制备方法

该方法适用于新鲜和冷冻标本

1.将组织(10-20mm)切成1-2mm的碎片,用缓冲液或培养液浸湿。2.1ml缓冲液或培养液预洗Medicon二遍。3.将组织和1ml缓冲液或培养液放入到Medicon中,盖上盖子,将Medicon插入到Medimachine中。4.降解组织。降解组织的时间长短依赖于组织类型。(参见降解时间表)5.用注射器通过Medicon上的注射器接口将上清吸去。6.1ml缓冲液或培养液冲洗Medicon三遍。7.选择适当大小孔径的Filcon滤器过滤细胞悬液。(50-mmFilcon适用于大多数组织,如:淋巴结、肿瘤组织、皮肤组织)8.1ml缓冲液或培养液冲洗Filcon三遍。9.250g离心细胞悬液5分钟。10.用适当的缓冲液或培养液重悬细胞沉淀。11.若需要,重复310步骤。12.调节细胞浓度至5×1051×106/ml13.用适当浓度的抗体280C100ml细胞悬液孵育15-30分钟。14.2ml冷的缓冲液或培养液(280C),250g离心5分钟。15.用缓冲液或培养液重悬细胞沉淀。16.分析样本。

注意:

1.在处理和接触有感染危险性生物样本时,应根据相关法规处理废液。避免皮肤或粘膜接触样本。勿用嘴移液2.该方法虽经验证,但客户需根据自己实验室条件及所处理的组织类型进行适当调整。

降解时间表:

组织

数量(3-6mm3小块)

脉冲

时间

条件

乳腺组织

36

2

30

新鲜或冷冻

膀胱

45

2

20

新鲜或冷冻

结肠

36

2

20

新鲜或冷冻

46

2

20

新鲜或冷冻

胃肿瘤边缘组织

36

2

20

新鲜或冷冻

健康组织、胃肿瘤

34

2

20

新鲜或冷冻

淋巴结

36

2

15

新鲜或冷冻

脾脏

36

2

15

新鲜或冷冻

肝脏

36

2

15

新鲜或冷冻

卵巢

36

2

30

新鲜或冷冻

前列腺

23

2

35

新鲜或冷冻

脑组织

36

1

10

新鲜或冷冻

肺组织

23

2

30

新鲜或冷冻

子宫

36

1

60

新鲜或冷冻

皮肤

34

1

45

新鲜或冷冻

注意:

该方法虽经验证,但客户需根据自己实验室条件及所处理的组织类型进行适当调整。

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