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MDCKEGFP稳定细胞株（犬肾细胞EGFP稳转细胞系）
mayitao
/发布时间:1632331802 /浏览量:214
| 货号： | CG010 |
| 生长状态： | 良好 |
| 运输方式： | 常温 |
| 器官来源： | 肾 |
| 是否是肿瘤细胞： | 否 |
| 细胞形态： | 贴壁 |
| 物种来源： | 犬 |
| 组织来源： | 上皮 |
| 细胞类型： | 贴壁 |
| 供应商： | 北京英茂盛业 |
| 规格： | 一瓶 |
MDCK-EGFP稳转细胞株
货号：CG010 MDCK-EGFP细胞株是用表达EGFP的慢病毒感染MDCK细胞，经嘌呤霉素筛选得到的多克隆细胞株。细胞稳定表达EGFP荧光蛋白，培养时无需抗生素维持。可作为慢病毒感染实验中的对照细胞株使用。 |  |
细胞特性：
细胞来源：MDCK(犬肾细胞）
细胞类型：EGFP稳定过表达多克隆细胞株
表达蛋白：EGFP
构建载体：pLV-EGFP-C（VL3215）
筛选抗生素：嘌呤霉素
培养基：DMEM高糖培养基+10%FBS
构建方法：
慢病毒载体pLV-EGFP-C包装为慢病毒，转染MDCK细胞，经嘌呤霉素筛选得到稳定表达EGFP荧光蛋白的多克隆细胞株。
细胞培养方法：
以25cm培养瓶传代为例。
1、传代前将细胞培养液、PBS和胰蛋白酶温浴到37℃。
2、吸去细胞培养液。
3、用PBS漂洗1到2次。
4、加入3ml胰蛋白酶，轻轻晃动细胞瓶，使胰蛋白酶均匀覆盖细胞。吸去胰蛋白酶，将培养瓶放置在细胞培养箱中，37摄氏度消化。由于配制的胰蛋白酶活力有差别，消化时间可用30秒到1分钟。应在倒置显微镜下观察，看到细胞分开及稍微变圆即可。
5、加入5ml细胞培养基，用吸管轻柔吹打分散细胞。
6、按1:3到1:5接种细胞。
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