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稳转细胞株的构建
mayitao
/发布时间:1630949408 /浏览量:307
| 提供商： | 上海麒盟生物科技有限公司 |
| 服务名称： | 稳转细胞株的构建 |
| 规格： | 细胞技术 |
稳转细胞株的构建
外源基因在细胞中的表达可分为两大类，一类是瞬时表达，一类是稳定表达（永久表达）。前者外源DNA/RNA不整合到宿主染色体中，虽然可以达到高水平的表达，但通常只持续几天，而后者外源DNA整合到宿主细胞染色体上，使宿主细胞可长期表达目的基因，稳转细胞系的构建即为后者。建立稳定细胞株，一般是根据不同基因载体中所含有的抗性标志选用相应的药物对靶细胞进行筛选。最常用的抗性标记基因有潮霉素（hygromycin）、新霉素（neomycin）和嘌呤霉素（puromycin），常用HygromycinB、G418和puromycin进行选择性筛选。
稳定表达细胞株在细胞中能持续稳定表达特定基因或干扰特定基因表达。目的基因质粒DNA整合到细胞染色体上，使细胞长期稳定表达该基因。稳定表达细胞株弥补了瞬时感染（或转染）一些功能实验中由于外源基因表达时间短的缺陷，便于长期观察基因对于细胞功能的影响以及蛋白间相互作用。
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