上海抚生实业有限公司

ShanghaiFushengIndustrialCo.,Ltd.

成立于2012年，经过数年的努力已迅速成为集科研和生产为一体的专业化生物工程公司。特别是ELISA研发，代测，技术服务这一产品已使上海抚生成为中国知名公司。

公司产品涵盖ELISA研发、细胞培养，各种生化试剂、各种酶类、分子生物学试剂盒、培养基、自产实验室耗材、小型仪器等。此外、上海抚生还代理了美国药典标准品，中检所标准品，sigma,Sciencell,ATCC,wak0,omega，Worthington、MBI、Bioworld、Calendon等国外各类知名公司的产品。

上海抚生将进一步加强人才经营、产品经营，不断提升企业的核心竟争力，实现具有高科技产业体系、知识化创业团队的国际化的公司，服务于生命科学领域，迎接世界经济一体化所带来的机遇与挑战。

技术服务内容：
实验步骤包括RNA提取、反转录、PCR和琼脂糖凝胶电泳，以软件分析电泳条带的灰度值（IOD值），通过与内参基因的灰度值比较，判断目的mRNA的相对表达量。

产品名称：胸膜肺炎放线杆菌PCR检测试剂盒
英文名称：ActinobacilluspleuropneumoniaePCR
规格：50T
分类：PCR检测试剂盒
储存条件：-20℃避光保存，避免反复冻融。
运输：低温、避光，快递免费送货上门。
鲍原理是由一对引物介导，能在动植物体外对特定基因(DNA)片断进行快速酶促扩增，经过n个热循环扩增，扩增产物中所含特定基因数是原始模板数的(1+E)n(0＜E＜1,扩增效率＝倍，使得检测扩增产物中的特定基因成为可能。
特异性强
PCR反应的特异性决定因素为：
①引物与模板DNA特异正确的结合；
②碱基配对原则；
③TaqDNA聚合酶合成反应的忠实性；
④靶基因的特异性与保守性。
荧光定量PCR试剂盒制造技术：
本实用新型技术公开了一种实时荧光定量PCR试剂盒，包括盒体，盒体由上盒体和下盒体组成，上盒体的底面上设有限位凸起，下盒体的顶面上设有与限位凸起匹配的凹槽，且在下盒体左右侧壁的下端均软连接有侧盖，侧盖远离下盒体的一端连接有卡勾，下盒体的上端边缘处设有环形凸起，两个卡勾分别勾住环形凸起的左右两端将上盒体固定在下盒体上；凹槽的内部设有固定杆，固定杆上通过转动件转动连接有用于放置试管的试管架；下盒体的左右两侧均设置有收纳槽。本实用新型技术通过将盒体分为上下组合的两个部分，并将两个部分通过侧盖连接，即可保证试剂盒的便携性，同时使用试剂盒自带的试管可提高检测的效率。

产品特点：
1.使用化学修饰的热启动聚合酶，反应特异性高，*程度地避免了非特异扩增；
2.反应缓冲液经充分优化，反应灵敏快速，40个循环只需20多分钟；
3.抗干扰能力强，反应重复性高，适合对土壤、粪便、肿瘤和血液来源的复杂样本中的靶基因进行检测分析。
在PCR反应体系中加入荧光基团，利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程，zui后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。
特异性荧光标记：
TaqMan法
TaqMan探针的特性：
（1）5端标记有报告基团（Reporter,R），如FAM、VIC等
（2）3端标记有荧光淬灭基团（Quencher,Q）
（3）探针完整，R所发射的荧光能量被Q基团吸收，无荧光，R与Q分开，发荧光
（4）Taq酶有53外切核酸酶活性，可水解探针
相对定量通过内标定量：
内标（EndogenousControl）通常是-actin、GAPDH基因等看家基因，在细胞中的表达量或在基因组中的拷贝数恒定，受环境因素影响小，内标定量结果代表了样本中所含细胞或基因组数量。
相对定量分析方法：
2-Ct
前提：目标序列和内参序列的扩增效率接近100％且偏差在5％以内
1、用内参基因的CT值归一目标基因的CT值：
CT（test）=CT（target,test）-CT（ref,test）
CT（calibrator）=CT（target,calibrator）-CT（ref,calibrator）
2、用校准样本的CT值归一试验样本的CT值：
CT=CT（test）-CT（calibrator）
3、计算表达水平比率：
2CT=表达量的比值

兔子可溶性CD40配体(sCD40L)ELISA试剂盒进口/分装英文名称：differentiation40ligand,sCD40LELISAKit规格:96T/48T

兔主要组织相容性复合体Ⅰ类(MHCⅠ/RLAⅠ)ELISA试剂盒进口/原装英文名称：RabbitmajorhistocompatibilitycomplexⅠ,MHCⅠ/RLAⅠELISAKit规格:96T/48T

兔子高迁移率族蛋白B1(HMGB-1)ELISA试剂盒特价促销英文名称：RabbitHighmobilitygroupproteinB1,HMGB-1ELISAKit规格:96T/48T

兔子B细胞淋巴瘤因子2(Bcl-2)ELISA试剂盒特价供应英文名称：RabbitB-cellleukemia/lymphoma2,Bcl-2ELISAKit规格:96T/48T

兔色素上皮衍生因子(PEDF)ELISA试剂盒进口/分装英文名称：Rabbitpigmentepithelium-derivedfactor,PEDFELISAKit规格:96T/48T

兔抗糖蛋白抗体(GP)ELISA试剂盒进口/原装英文名称：Rabbitanti-glycoproteinantibody,GPELISAKit规格:96T/48T

兔抗单核细胞抗体(AMA)ELISA试剂盒特价促销英文名称：Rabbitanti-Monocyteantibody,AMAELISAKit规格:96T/48T

兔氧化低密度脂蛋白抗体(OLAb)ELISA试剂盒特价供应英文名称：Rabbitoxidizedlowdensitylipoproteinantibody,OLAbELISAKit规格:96T/48T

兔抗平滑肌抗体(ASMA)ELISA试剂盒进口/分装英文名称：RabbitAnti-SmoothMuscleAntibody,ASMAELISAKit规格:96T/48T

兔子白介素9(IL-9)ELISA试剂盒进口/原装英文名称：RabbitInterleukin9,IL-9ELISAKit规格:96T/48T

兔载脂蛋白A1(apo-A1)ELISA试剂盒特价促销英文名称：RabbitapoproteinA1,apo-A1ELISAKit规格:96T/48T

兔纤溶酶抗纤溶酶复合物(PAP)ELISA试剂盒特价供应英文名称：Rabbitplasmin-antiplasmincomplex,PAPELISAKit规格:96T/48T

兔纤溶抑制因子/凝血酶激活的纤溶抑制物(TAFI)ELISA试剂盒进口/分装英文名称：RabbitThrombinactivatablefibrinolysisinhibitor,TAFIELISAKit规格:96T/48T

兔子白介素2(IL-2)ELISA试剂盒进口/原装英文名称：RabbitInterleukin2,IL-2ELISAKit规格:96T/48T

兔血浆颗粒膜蛋白(GMP-140)ELISA试剂盒特价促销英文名称：Rabbitalpha-granularmembraneprotein,GMP-140ELISAKit规格:96T/48T

兔一氧化氮(NO)ELISA试剂盒特价供应英文名称：Rabbitnitricoxide,NOELISAKit规格:96T/48T

兔补体蛋白3(C3)ELISA试剂盒进口/分装英文名称：RabbitComplement3,C3ELISAKit规格:96T/48T

兔p物质(SP)ELISA试剂盒进口/原装英文名称：RabbitSubstanceP,SPELISAKit规格:96T/48T

兔子层连蛋白/板层素(LN)ELISA试剂盒特价促销英文名称：RabbitLaminin,LNELISAKit规格:96T/48T

兔环磷酸腺苷(cAMP)ELISA试剂盒特价供应英文名称：Rabbitcyclicadenosinemonophosphate,cAMPELISAKit规格:96T/48T

兔血管性血友病因子/瑞斯托霉素辅因子(VWF)ELISA试剂盒进口/分装英文名称：RabbitvonWillebrandFactor,VWFELISAKit规格:96T/48T

兔血管内皮细胞生长因子(VEGF)ELISA试剂盒进口/原装英文名称：RabbitVascularEndothelialcellGrowthFactor,VEGFELISAKit规格:96T/48T

兔骨桥素(OPN)ELISA试剂盒特价促销英文名称：RabbitOsteopontin,OPNELISAKit规格:96T/48T

胸膜肺炎放线杆菌PCR检测试剂盒兔子脂蛋白磷脂酶A2(Lp-PL-A2)ELISA试剂盒特价供应英文名称：Rabbitlipoprotein-associatedphospholipaseA2,Lp-PL-A2ELISAKit规格:96T/48T

兔血清总补体(CH50)ELISA试剂盒进口/分装英文名称：Rabbit50%complementhemolysis,CH50ELISAKit规格:96T/48T

PCR检测方法包括以下步骤：
(1)将参照基因与待测目的基因片段等比例连接，克隆到同一个质粒载体上，构建一种可同时用于参照基因以及待测目的基因扩增检测的标准品，并将所得标准品按照浓度梯度稀释后同时用于绘制参照基因以及待测目的基因的标准曲线；
(2)待测样本与步骤(1)所述标准品经同步进行实时荧光定量PCR扩增后，目的基因与参照基因按照各自的标准曲线计算各自的拷贝数，计算待测样本的目的基因与参照基因拷贝数比值，即得目的基因的拷贝数相对定量检测结果。
其中步骤(1)为：将参照基因与待测目的基因片段等比例连接，克隆到同一个质粒载体上，构建一种可同时用于参照基因以及待测目的基因扩增检测的标准品，并将所得标准品按照浓度梯度稀释后同时用于绘制参照基因以及待测目的基因的标准曲线。
其中所述参照基因为本领域常规参照基因，较佳地管家基因，优选地为RPPH1的扩增区域，其中所述质粒载体为本领域常规质粒载体，较佳地为PCR克隆载体，优选地为TAcloning载体，所述TAcloning载体较佳地为pMD18-T载体。其中所述标准品的核酸序列如序列表中SEQIDNO:6所示。所述的等比例较佳地为1：1。由于标准品中待测目的基因与参照基因的比例为1:1，解决了目前相对标准曲线法应用中目的基因与参照基因的浓度比例关系难以控制的问题，提高HER2基因扩增检测的可靠性。
步骤(2)为：待测样本与步骤(1)所述标准品经同步进行实时荧光定量PCR扩增后，目的基因与参照基因按照各自的标准曲线计算各自的拷贝数，计算待测样本的目的基因与参照基因拷贝数比值，即得目的基因的拷贝数相对定量检测结果。
其中所述待测目的基因为本领域常规待测目的基因，较佳地为肿瘤或者疾病的特异性基因，更佳地为HER2基因的扩增区域，所述荧光定量PCR扩增为本领域常规荧光定量PCR扩增方法，所述荧光定量PCR扩增方法较佳地为多通道荧光定量PCR扩增，更佳地为双通道荧光定量PCR扩增。