Qubit® 3.0 荧光定量仪工作原理相关交流-蚂蚁淘在线

Qubit® 3.0 荧光定量仪工作原理

mayitao /发布时间:1510102150 /浏览量:99

灵敏，准确，经济实惠
qubit®3.0荧光定量仪为全新升级的台式荧光计，配套高灵敏的Qubit®定量分析试剂盒，精确定量DNA,RNA和蛋白质浓度。采用专门研制的荧光染料，只有与样品中的靶分子特异结合时方可发射荧光信号，从而报告靶分子的浓度，因此这种特异性可以使您获得比传统紫外吸光法更加精确的结果。
Qubit®3.0荧光定量仪主要特点包括：

强大的双核处理器，5秒内快速准确地定量DNA,RNA和蛋白
最低检测1μL样品（10pg/μLDNA或12.5μg/mL蛋白）
最多储存1,000个样品结果，可通过U盘导出或直接与电脑连接
5.7英寸大尺寸彩色触摸屏，直观的导航按钮
个性化设置常规使用的应用，添加新的应用，甚至通过 MyQubit自定义创建新应用

灵活选择操作语言，包括英语，简体中文，法语，西班牙语，德语，意大利语及日语

Qubit®3.0 荧光定量仪尤其适用于：

■ 您的样品十分稀有且难以处理

■ 提取后的dsDNA，oligos，RNA（包括microRNA）或蛋白质量很少

■ 该样品将被用于成本昂贵的下游实验

■ 这些样品将用于实时定量PCR（qPCR）或下一代测序法（NGS）等需要精密测定的实验

■ 接下来要进行转染或其他应用，需要几天或几周才能获得结果的实验

■ 您的样品制备过程复杂，需要激光显微切割（LCM）等特殊技术

Qubit®荧光定量仪的工作原理

灵敏，准确的生物分子定量

Qubit®荧光定量仪采用荧光染料与特异性的靶分子结合。这些荧光染料只有与这些靶分子结合时才会发射荧光信号，即使在浓度很低时（图1）。Qubit®3.0荧光定量仪比传统的紫外吸光法更加准确。以往的紫光吸光法不具选择性，测量260nm所有分子的吸光值——包含DNA，RNA，蛋白质，游离核苷酸或多余的盐离子。此外，紫外分光光度计的灵敏度不足，无法完成低浓度DNA和RNA的精确定量（图2）。使用Qubit®荧光定量仪，将大大提升您研究的准确性。因为Qubit®分析试剂盒里的荧光染料只与样品中的特异分子结合——DNA,RNA或蛋白，避免不准确测量带来的重复工作。

	图1.Qubit®dsDNAHS分析试剂盒的性能. The Quant-iT®dsDNAHSAssay具有0.2–100ng线性定量范围，在样品中有同等量的RNA时选择性的结合dsDNA。

图2.Qubit®定量检测平台的精确度和准确性。将浓度范围从0.01到10ng/uL的10份lambdaDNA，在Qubit®荧光定量仪上使用 Quant-iT®dsDNAHS分析试剂盒按说明书操作进行检测。相同的10份lambdaDNA样品采用Nanodrop®ND-1000分光光度计进行分析，将这种检测方法结果的准确性和精确度进行比较。每一个柱代表10份样品的平均值。误差线代表10个样品的标准差。列出的浓度为加入Qubit®分析管之前的起始样品中的DNA浓度。

单个样品检测非常简单

Qubit®3采用更具人性化的界面，快速简单地获得实验结果。大尺寸的彩色触摸屏和Android系统，使得操作非常简单直观。浓度计算和设置都由仪器自动完成（图3）。Qubit®最多可储存1000个样品结果，您可以通过U盘导出，也可以使用USB连接线直接与电脑相连。此外，在样品的延伸范围或超过试剂盒的检测范围，屏幕上均会有图形显示（图4）。

图3.Qubit®3.0荧光定量仪操作
	图4.Qubit®3.0荧光定量仪的标准曲线，显示样品浓度是处于延伸范围（extendedrange）或超出范围（不显示）

适用于Qubit®荧光定量仪的试剂盒

Qubit®试剂盒均采用相同的操作方案，只是孵育和读数稍有差异。其中DNA和RNA分析试剂盒仅需孵育2分钟，而蛋白分析试剂盒需要15分钟（图5）。Qubit®3.0荧光定量仪自动保存您的数据，您可以用USB数据线或U盘导出。除了常规的dsDNA，oligos，总RNA，microRNA和蛋白质的分析试剂盒，在IonPersonalGenomeMachine®(PGM™)测序仪上进行测序之前，可以使用专门的IonSphere™QualityControlKit在Qubit®3.0上进行IonSphere™颗粒质量评估。

■ 了解Qubit®分析试剂盒

图5.Qubit®定量试剂盒操作流程. 与Qubit®3.0荧光定量仪配套使用，Qubit®定量试剂盒提供无缝工作流程和简单的数据读取。每一个Qubit®分析试剂盒提供浓缩的分析试剂，稀释缓冲液和预稀释的标准品。先用提供的缓冲液稀释试剂，加入样品（1-20uL之间的任何体积），读取Qubit®3.0定量仪上的浓度即可。这些试剂盒均在常温进行操作，信号稳定时间长达3小时。

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