武汉优博生物技术有限公司开发的SYBR实时荧光定量PCR（Real-timePCR）就是在PCR反应体系中加入荧光染料与DNA双链的结合的原理，实时监测整个PCR进程，判定即时测定特异性产物的量和推断出初始基因的量，可快速、灵敏的检测样本的RNA和DNA，在动物病原体基因的检测，畜禽产品的检验检疫，生物制品的鉴定等领域广泛应用。

与常规PCR反应相比，实时荧光定量PCR（Real-timePCR）技术具有特异性更强、有效解决PCR污染问题、自动化程度高等特点。

武汉优博生物技术有限公司技术人员根据荧光定量PCR原理在常规PCR基础上加入相应的荧光染料来实现其定量功能的。随着PCR反应的进行，PCR反应产物逐渐增加，荧光信号强度也等比例增加。每经过一个循环，收集一个荧光强度信号，这样我们就可以通过荧光强度变化监测产物量的变化，从而得到一条荧光扩增曲线图。

荧光扩增曲线可以分成三个阶段：荧光背景信号阶段，荧光信号指数扩增阶段和平台期。在荧光背景信号阶段，扩增的荧光信号被荧光背景信号所掩盖，无法判断产物量的变化。而在平台期，扩增产物已不再呈指数级的增加，PCR的终产物量与起始模板量之间没有线性关系，根据最终的PCR产物量也不能计算出起始DNA拷贝数。只有在荧光信号指数扩增阶段，PCR产物量的对数值与起始模板量之间存在线性关系，我们可以选择在这个阶段进行定量分析。为了定量和比较的方便，在实时荧光定量PCR技术中引入了两个非常重要的概念：荧光阈值和CT值（如下图所示）。Ct值：是指每个反应管内的荧光信号到达设定域值时所经历的循环数。研究表明，每个模板的Ct值与该模板的起始拷贝数的对数存在线性关系，起始拷贝数越多，Ct值越小。利用已知起始拷贝数的标准品可作出标准曲线，其中横坐标代表起始拷贝数的对数，纵坐标代表Ct值如下图所示。因此，只要获得未知样品的Ct值，即可从标准曲线上计算出该样品的起始拷贝数。

荧光域值（threshold）的设定

PCR反应的前15个循环的荧光信号作为荧光本底信号，荧光域值的缺省设置是3-15个循环的荧光信号的标准偏差的10倍，即：threshold=10’SDcycle6-15

Ct值与起始模板的关系

研究表明，每个模板的Ct值与该模板的起始拷贝数的对数存在线性关系，起始拷贝数越多，Ct值越小。利用已知起始拷贝数的标准品可作出标准曲线，其中横坐标代表起始拷贝数的对数，纵坐标代Ct值。因此，只要获得未知样品的Ct值，即可从标准曲线上计算出该样品的起始拷贝数Real-timePCR详细介绍。

武汉优博生物技术有限公司开发的SYBR实时荧光定量PCR（Real-timePCR）检测技术为国内首创，与国际品牌的公司开发的技术相比，具有检测技术更灵敏，成本更低，实用性更强的优势。