荧光定量PCR检测试剂盒
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Subcloning Tips very important heating step
蚂蚁淘
/发布时间:1545759371 /浏览量:74
| Source:Schimmelpenninck |
| Abstract:PutyourinsertandvectorinanEppendorfftubeandthenheatitfor5minutes,thenaddligationbufferandligase |
| AfterisolatingyourdigestedfragmentsfromthegelputdigestedvectoranddigestedinsertTOGETHERinanEppendorfftube,thenputthisforabout5minutesat65degreescelsius,thencoolitandspinitdown,thenaddyourligationbufferandligase.The65degreescelsiusstepisVERYimportant. Shortexplanation:yourinsertisEcoRI/SalIandvectorisEcoRI/SalITheheatingstepwillbreakalltheUNWANTEDANDTOTALLYUSELESSinsert-insertandvector-vectorbindings.AftertheheatingstepMANYgoodvectorinsertbindingswilloccurandyourplateswillbefullofgoodtransformants.
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