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bca法测定蛋白质浓度时，需要用参比溶液调0么，像平时测吸光度都需要先用参比溶液调0再测，看试剂盒说明书好像没说到要调0的，其次稀释液是不是用裂解液合适呢，另外做了标准曲线后，在562nm下比色，这比色的步骤是什么呢
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回复：时间：2021-08-19
Bicinchoninic acid (BCA )法是在世界上常用的蛋白浓度检验方法之一BCA法基础上改进而成。其原理与Lowery法蛋白定量相似，即在碱性环境下蛋白质与Cu 2+ 络合并将Cu 2+ 还原成Cu + 。两分子BCA与一个Cu + 螯合形成稳定的紫蓝色复合物，在562 nm处有高的光吸收值并与蛋白质浓度成正比，据此可测定蛋白质浓度。组成与储存：组分名称 规格 保存BCA Reagent100ml2-8℃Cu Reagent3.0ml2-8℃BSA标准液5 mg/ml1ml -20ºC冻存可进行500T微板(microplate)测定或50T2ml比色杯测定。
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