定量试剂盒

2021-08-20【求助】考马斯亮蓝蛋白定量试剂盒测定小肽浓度

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各位同仁好,我想问下关于考马斯亮蓝法测定蛋白(小肽)浓度的准确度到底有多高?为什么我同一个东西三次测得的结果的都不一样,而且相差很大!我的小肽第一次测得是3.7mg/ml(稀释15倍),第二次测得为3.0mg/ml(稀释15倍),第三次测得为2.5mg/ml,可以肯定我的蛋白没有降解,而且测定时间间隔不超过两天。不知道大家对于该法测定蛋白浓度时有什么好的见解~~~OD595值应控制在多少最好?我的稀释15倍时OD值在0.5-0.6之间,但是我稀释7.5倍,OD595落在0.7-0.8之间,这样的话后面算出来的值肯定比前面的低,请问我该如何取舍呢?谢谢大家给予建议!!!
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回复:时间:2012-08-13

还有第三次测定时稀释7.5倍,因此算出来的蛋白浓度偏低~~~

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回复:时间:2012-08-20

只有分子量在3K以上的小肽才可以用考马斯亮蓝法