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基因表达
基因表达
基因表达是指基因指导下的蛋白质合成过程。生物体生命活动中并不是所有的基因都同时表达,代谢过程中所需要的各种酶和蛋白质的基因以及构成细胞化学成分的各种编码基因,正常情况下是经常表达的,而与生物发育过程有关的基因则要在特定的时空才表达。
逆转录PCR
1.概念和原理
RT-PCR称为逆转录PCR或反转录PCR,是指在体外将mRNA逆转录为互补cDNA后,再以此为模板通过PCR进行DNA扩增的技术。
2.科研和临床应用
主要用于特异基因mRNA表达水平的检测、病原体定性检测、获得特异基因的编码序列用于后期表达载体构建等领域。
实时荧光PCR/实时荧光RT-PCR
1.概念和原理
Real-time
PCR/real-timeRT-PCR是在普通PCR反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程,最后可通过标准曲线或参比样本对模板中目的DNA/RNA片段进行定量分析的技术。根据采用的荧光基团的不同,可以初略分为Taqman探针法和SYBRGreen染料法。
2.科研和临床应用
由于可以从各种样本中大量扩增目的基因片段并进行相对或绝对定量,因此,可广泛应用于=感染性疾病病原体(如细菌、流感病毒、手足口病毒.HIV.HBV.HPV.
EBV.CMV.TB.支原体、衣原体等)的检测与定量分析、肿瘤相关基因的检测与研究、药物对基因表达水平的影响、与药物疗效监控相关的基因的检测与研究等各种涉及到基因检测的领域。
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