- 河南立科达医疗用品科技有限公司
- 基于RPA技术检测菜豆普通花叶病毒的引物、探针、试专利_专利...
- 试剂器材/DNA测序仪
- 【求助】关于RAPD引物的一些疑问。 核酸基因技术
- 神经递质,酶,激素,抗体,发挥作用后的去向是¨??谁知道具...
- elisa试剂盒品牌推荐|小鼠elisa试剂盒_elisa试...
- 酵母遗传学方法1:DNA分离资讯
- 放射诊疗管理规定_全文
- UFC 200 Cain Velasquez Full B...
- 含有艾滋病毒的载体,比如阴道分泌物在体外能活多久啊 艾滋问...
- 关于人体温调节的叙述,不正确的是( )A. 体温的稳定有利于...
- 随机引物工作原理、特性、用途应用范围制药机械百科
- [07-31]引物设计
- [10-01]【请问质粒和基因表达载体有什么区别?】
- [08-25]体内逆转录到底用不用引物(⊙o⊙)?【生物竞赛吧】
- [10-01]PCR引物设计原则之个人心得篇[心得点评]
- [10-01]什么是锚定引物_问答详情_引物_分子诊断_诊断原料_蚂蚁淘,【正品...
- [10-01]生物中的引物是什么东西?_
- [10-01]PCR引物和测序引物有什么异同? 核酸基因技术论坛
- [08-01]“题”说PCR的引物问题
- [07-26]RNA引物设计怎么设计?_
引物设计及引物修饰FAQ_引物相关问题及工具金斯瑞
引物设计是一小段单链DNA或RNA,在核酸合成反应时,作为每个多核苷酸链进行延伸的出发点而起作用的多核苷酸链。
中文名
引物设计
外文名
primerdesign
用途
PCR扩增
所属学科
生物学
引物设计[1]是一小段单链DNA或RNA,作为DNA复制的起始点,在核酸合成反应时,作为每个多核苷酸链进行延伸的出发点而起作用的多核苷酸链,在引物的3′-OH上,核苷酸以二酯链形式进行合成,因此引物的3′-OH,必须是游离的。
1、长度:15—30bp,其有效长度[Ln=2(G十C)十(A十T)]一般不大于38,否则PCR的最适延伸温度会超过Taq酶的最佳作用温度(74度),从而降低产物的特异性。
2、G十c含量:应在40%一60%之间,PCR扩增中的复性温度一般是较低Tm值引物的Tm值减去5—10度。引物长度小于20时,其Tm恒等于4×(G十C)十2×(A十T)。
3、碱基分布的随机性:应避免连续出现4个以上的单一碱基。尤其是不应在其3’端出现超过3个的连续G或C,否则会使引物在G十C富集序列区错误引发。
4、引物自身:不能含有自身互补序列,否则会形成发夹样二级结构。
5、引物之间:两个引物之间不应有多于4个的互补或同源碱基,不然会形成引物二聚体,尤应避免3’端的互补重叠。
6、上下游引物的互补性:一个引物的3‘末端序列不允许结合到另一个引物的任何位点上。
7、3’末端:如果可能的话,每个引物的3‘末端碱基应为G或C。
8、引物应当超出限制性内切酶识别位点至少3个核苷酸。
参考资料
1.引物设计.引物设计详细介绍.2011[引用日期2012-05-23]
================ 蚂蚁淘在线 ================
免责声明:本文仅代表作者个人观点,与本网无关。其创作性以及文中陈述文字和内容未经本站证实,对本文以及其中全部或者部分内容、文字的真实性、完整性、及时性本站不做任何保证或承诺,请读者仅作参考,并请自行核实相关内容
版权声明:未经蚂蚁淘在线授权不得转载、摘编或利用其他方式使用上述作品。已经经本网授权使用作品的,应该授权范围内使用,并注明“来源:蚂蚁淘在线”。违反上述声明者,本网将追究其相关法律责任。