一些基本概念和基本知识：1荧光免疫测定技术的概念：将试剂抗原或试剂抗体用荧光素进行标记，试剂与标本中相应的抗体或抗原反应后，测定复合物中的荧光素，这种免疫技术，称为免疫荧光素技术。2.技术分类：⑴荧光抗体技术(荧光显微镜技术)抗原抗体反应后，利用荧光显微镜判定结果的检测方法。⑵免疫荧光测定技术：抗原抗体反应后，利用特殊仪器测定荧光强度而推算被测物浓度的检测方法3.荧光的产生：物质吸收外界能量而进入激发状态，在回复基态时多余的能量以电磁辐射的形式释放，即发光，这种光称为荧光。这种物质，称为荧光素由光激发所引起的荧光，为光致荧光------荧光免疫技术由化学反应所引起的荧光，为化学荧光------化学发光技术4.荧光素的荧光特性：⑴停止供能，荧光现象随即终止⑵对光的吸收和荧光的发射具高度选择性入射光波长<发射光波长⑶荧光效率：发射荧光的光量子数荧光效率=-------------------------------吸收光的光量子数⑷荧光猝灭现象：荧光素的辐射能力减弱5.常见荧光素：⑴FITC⑵RB200⑶TRITC⑷镧系：Eu、Tb⑸PE⑹其它常见荧光素的特性：⑴FITC：黄色结晶粉末，吸收光：490~495nm，发射光：520~530nm，明亮的黄绿色荧光。⑵RB200：橘红色粉末,吸收光570nm，发射光595~600nm，橘红色荧光。⑶TRITC：紫红色粉末，吸收550nm，发射光620nm，橙红色荧光。⑷镧系：Eu、Tb⑸PE：吸收光490~560nm，发射光595nm，红色荧光。⑹其它：酶作用后产生荧光物质。酶作用后产生荧光物质：酶底物产物激发光发射光Β-GMUGMU360450APMUPMU360450HRPHPA二聚体3174146.合适荧光素的选择⑴具有与蛋白质形成共价键的化学基团。荧光素-N=C+NH-蛋白质荧光素-N-C-N-蛋白质‖︱︱‖︱SHHSH⑵荧光效率高，标记后下降不明显。⑶荧光色泽与背景色泽对比鲜明。⑷标记后能保持生物学活性和免疫活性⑸标记方法简单、快速。⑹安全无毒

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