限制性内切酶

甲基化敏感限制性内切酶(MSRE)法

methylationsensitiverestrictionendonuclease,MSRE是一类对其识别位点含有甲基化碱基敏感的限制性内切酶,目前至少已发现320种。此类酶如在其切割位点中含有一个甲基化碱基,则它们中的绝大多数就不能切割DNA。MSRE法是基于甲基化敏感Ⅱ型限制性内切酶不能切割含有一个或多个甲基化切点序列的基本原理。用甲基敏感Ⅱ型内切酶及其同工酶(对甲基化不敏感)切割含有一个或多个甲基化CpG序列的片段,然后用DNA印迹法分析。此法的最大优点就是无须知道靶DNA一级结构的详细信息,并可提供CpG岛甲基化状态的直接评价,包括取得一些对被检基因甲基化的定量分析信息。但该法除了需要大量的高相对分子质量DNA(≥5ug)外,还只能检测到拷贝数比例大于百分之几的甲基化等位基因,并且仅能提供MSRE识别序列中那些CpG岛甲基化状态的信息。

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