限制性内切酶

2008-11-25【求助】基因组dna酶切

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最近准备做southern,但是提取的苜蓿基因组dna酶切总是不尽如人意
同一管dna有的酶可以切开,比如dra1,ecoR1,Hind111
有的酶又完全不能切动,如BamH1,sac1,xba1,xho1,pst1
请问高手这是什么原因??
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回复:时间:2008-11-29

没人理?

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回复:时间:2008-11-27

求助:我用takaRaDNA试剂盒提取全血基因组DNA,之后进行限制性酶切,急求:酶切后的DNA怎样纯化再进行PCR反应阿,希望有同道帮帮忙,着急

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回复:时间:2008-12-01

求助:我用takaRaDNA试剂盒提取全血基因组DNA,之后进行限制性酶切,急求:酶切后的DNA怎样纯化再进行PCR反应阿,希望有同道帮帮忙,着急应该是与DNA精致是一样的,在离心管中加入等体积的氯仿异戊醇,然后去上清,然后乙醇沉淀,就可以了,只是个人愚见,不知道这样能否可行!祝好运!

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回复:时间:2008-11-26

好的,我试试了,谢谢快乐驿站

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回复:时间:2008-12-07

nestea110最近准备做southern,但是提取的苜蓿基因组dna酶切总是不尽如人意同一管dna有的酶可以切开,比如dra1,ecoR1,Hind111有的酶又完全不能切动,如BamH1,sac1,xba1,xho1,pst1请问高手这是什么原因??我只是想问一个问题:为什么必须要这些酶都能切开呢?万一基因组上本来就没有这些酶切位点,你要是切开了岂不是才叫不尽人意啊,哈哈

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回复:时间:2008-12-07

westernblotx我只是想问一个问题:为什么必须要这些酶都能切开呢?万一基因组上本来就没有这些酶切位点,你要是切开了岂不是才叫不尽人意啊,哈哈有文献上用这些酶切开了,而我切不开

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回复:时间:2008-11-29

nestea110最近准备做southern,但是提取的苜蓿基因组dna酶切总是不尽如人意同一管dna有的酶可以切开,比如dra1,ecoR1,Hind111有的酶又完全不能切动,如BamH1,sac1,xba1,xho1,pst1请问高手这是什么原因??这说明您提的DNA质量差别较大呀?不知道您是如何解决的?

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回复:时间:2008-12-02

基因组不是那么容易就切开的要考虑甲基化的问题