酶切反应条件如下：在20µlPCR产物混合体系中加入5U的内切酶，按相应的反应温度温育1小时。通常20µlPCR产物体系中含有1µg底物DNA，1单位的VentDNA聚合酶，1×ThermoPolBuffer[10mMKCl，20mMTris-HCl（PH8.8@25°C），10mM(NH₄)₂SO₄,2mMMgSO4和0.1%TritonX-100]，以及终浓度为200µM的dNTPs。表中标记有*的内切酶在酶切反应前需加入NaCl（终浓度为100mM）或相应的10×NEBuffer（1×终浓度）。

注意：在非最佳条件下进行酶切反应容易出现星号活性。要避免星号活性或希望取得更好的酶切效果，则需用乙醇沉淀纯化DNA，再将其溶解于相应的酶切缓冲液。此外，如果使用不纯的DNA聚合酶，会因其中混有其它核酸酶而影响整个反应结果。

+++表示完全切割；++表示约50%被完全切割；+表示约25%被完全切割。

================  蚂蚁淘在线  ================

免责声明：本文仅代表作者个人观点，与本网无关。其创作性以及文中陈述文字和内容未经本站证实，对本文以及其中全部或者部分内容、文字的真实性、完整性、及时性本站不做任何保证或承诺，请读者仅作参考，并请自行核实相关内容

版权声明：未经蚂蚁淘在线授权不得转载、摘编或利用其他方式使用上述作品。已经经本网授权使用作品的，应该授权范围内使用，并注明“来源：蚂蚁淘在线”。违反上述声明者，本网将追究其相关法律责任。