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活动日期:2017.07.13-2017.9.30
ExFiTusionDNA聚合酶是一种高度热稳定的DNA聚合酶,来源于嗜热菌Thermococcussp.4557的PolB基因,通过单链DNA结合结构域融合及多个关键位点的基因进化,经大肠杆菌表达及多种介质纯化而得到。酶的分子量为106kDa。
产品特色
1. 更高保真性;
2.更快的扩增速度,延伸速度为3-4kb/min;
3.可很好的扩增8kb的DNA模板片段;
4.稳定性、耐热性更好(炎热的夏季放置两个月仍能很好PCR扩增);
5.产物为平末端,可以直接克隆至平末端载体中。
活性定义
1单位(U)DNAPolymerase活性相当于在74°C,30分钟内,以大马哈鱼精子DNA作为模板引物,将10nmoldNTP掺入到酸不溶物质所需的酶量。
数据对比
分别使用必拓ExFiTusionDNA聚合酶和Thermo phusionhigh-fidelityDNApolymerase扩增目的片段(约8000bp)。反应体系如下:
必拓ExFiTusion DNA聚合酶 | Thermo phusionhigh-fidelity DNApolymerase | |
模板(20ng) | 1μl | 1μl |
上游引物 | 0.8μl | 0.8μl |
下游引物 | 0.8μl | 0.8μl |
Buffer | 2μl(10×Buffer) | 2μl(5×phusionHFbuffer) |
酶 | 0.2/0.5/1/2μl | 2μl |
H2O | 补齐至20μl | 补齐至20μl |
PCR程序:预变性95℃5min,变性95℃30s,退火55℃30s,延伸72℃4min,共30个循环。PCR产物加入6Xloadingbuffer,1%琼脂糖凝胶电泳图如下:
规格 | 必拓ExFiTusion DNA聚合酶 | Thermo phusionhigh-fidelity DNApolymerase |
100U | — | 770 |
500U | — | 3058 |
1000U | 690 | — |
5X1000U | 2560 | — |
咨询热线:18511779761 QQ:2711569587
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