内参抗体

2021-08-11【求助】请高手指教 关于内参抗体选择的疑惑

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我要做两个指标,检测这两个指标分别在大鼠和人肝癌细胞中的表达。
其中一个指标的一抗来源于兔,另一个一抗来源于鼠。前几天跟试剂公司联系购买内参抗体时,他们说内参抗体是根据目的蛋白的一抗来定的,要我买两个内参抗体和相应的二抗,这让我感到很纳闷。我想知道内参的选择是根据什么原则?
我觉得内参只是一个参照,内参抗体跟目的蛋白的一抗有直接联系吗?有没有可以通用于人肝癌细胞和大鼠肝癌细胞的内参抗体,能否帮忙推荐一个,谢谢.
在图书馆也没有找到这方面很详细和确切的论述,急切期盼您的指导!!!谢谢!!!
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回复:时间:2008-03-01

内参抗体和目的蛋白的一抗没什么太大关系,我们一直用GAPDH。一般来说,要确定内参在你的细胞里面高表达,像肝癌细胞GAPDH和beta-actin都可以,如果你想省事,内参最好和目的蛋白分子量有些差别,转膜后剪开分别一抗孵育,可以少跑一次胶。