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2021-08-11【求助】请高手指教 关于内参抗体选择的疑惑

五味子101
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我要做两个指标，检测这两个指标分别在大鼠和人肝癌细胞中的表达。
其中一个指标的一抗来源于兔，另一个一抗来源于鼠。前几天跟试剂公司联系购买内参抗体时，他们说内参抗体是根据目的蛋白的一抗来定的，要我买两个内参抗体和相应的二抗，这让我感到很纳闷。我想知道内参的选择是根据什么原则？
我觉得内参只是一个参照，内参抗体跟目的蛋白的一抗有直接联系吗？有没有可以通用于人肝癌细胞和大鼠肝癌细胞的内参抗体，能否帮忙推荐一个，谢谢．
在图书馆也没有找到这方面很详细和确切的论述，急切期盼您的指导！！！谢谢！！！
*请输入10-500个字符

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回复：时间：2008-03-01

内参抗体和目的蛋白的一抗没什么太大关系，我们一直用GAPDH。一般来说，要确定内参在你的细胞里面高表达，像肝癌细胞GAPDH和beta-actin都可以，如果你想省事，内参最好和目的蛋白分子量有些差别，转膜后剪开分别一抗孵育，可以少跑一次胶。

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