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回复:时间:2021-08-11
以GAPDH为内参的我做出来了,但目的蛋白的我没做出来。GAPDH为内参:一抗用的碧云天分装的抗体,浓度1:5000,二抗用的中杉的,浓度1:500.请问:我的组织放在-70度冰箱半年了,提的蛋白做WB,内参能做出来,是不是说明蛋白没问题?可是目的蛋白怎么一条带都没有了?希望高手给与指点。
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回复:时间:2021-08-17
常遇到的情况是GADPH做的出来,目的条带出不来的.个人也遇到过这样的情况,而且也是你说的那个公司,做了三次,次次如此,后来找别人要了一个其他公司的GADPH,一次成功.你找别人要点其他内参抗体来试试吧.Santa的抗体也算不上什么好抗体了,质量并不稳定.
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回复:时间:2021-08-19
我用GAPDH(康成的,1:1000做的,可回收用两三次),和ANTI-HA单抗(Roche,1:1000)混合一起做,效果还是很好的,没有互相干扰的现象发生。
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回复:时间:2021-08-11
以GAPDH为内参的我做出来了,但目的蛋白的我没做出来。GAPDH为内参:一抗用的碧云天分装的抗体,浓度1:5000,二抗用的中杉的,浓度1:500.请问:我的组织放在-70度冰箱半年了,提的蛋白做WB,内参能做出来,是不是说明蛋白没问题?可是目的蛋白怎么一条带都没有了?希望高手给与指点。
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