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2021-07-24求助动物多克隆抗体血清时有少量溶血。

asholic
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求助，我们免疫了小鼠，然后采用眼眶取血，之后10000g离心后发现上清的血清有少量溶血现象，发红。对后续的抗体实验有什么影响么，后续就初步硫酸铵纯化下抗体，做ELISA和间接荧光染色做流式之类的实验。这种有少量溶血的血清能用么

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相关回复

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回复：时间：2016-11-19

离心力过大或者是取的时候混入了杂质。一定程度的溶血对血清中生化指标的检测会产生一定的影响有色物质对吸收光谱的干扰,造成吸光度和散光度产生较大的误差,当被测溶液的颜色与有色物质的颜色接近时发生正干扰,而与有色物质的颜色相差较远时产生负干扰;溶血标本中血红素中的正铁离子,可被试剂中的氧化剂(如亚硝酸钠)氧化成为黄色的高铁血红素不知道你这个纯化过程会不会受到影响，还是建议你调整转速，把小鼠的胡须剪掉等

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回复：时间：2016-11-17

asholic求助，我们免疫了小鼠，然后采用眼眶取血，之后10000g离心后发现上清的血清有少量溶血现象，发红。对后续的抗体实验有什么影响么，后续就初步硫酸铵纯化下抗体，做ELISA和间接荧光染色做流式之类的实验。这种有少量溶血的血清能用么没有影响，不过常规小鼠血清离心3000转十分钟，10000g太高了。

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回复：时间：2016-11-13

离心速度太快了导致的。我们遇到过这种情况，对后续的纯化及检测没有干扰，可以继续使用，在纯化过程中这部分成分就被去除掉了，不必担心。如果你追求完美，可以重新采血。

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回复：时间：2016-11-20

没有影响

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回复：时间：2016-11-11

肯定不能用啊

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