2021-08-13【求助】多克隆抗体，原来是单一带，后出现了杂带？

Santa的一支抗体，以前做样品的时候，是很单一的条带，现在同样的细胞出来的样品，一直出现杂带，就在原来的位置附近，靠得很近，而且很深，都分不清现在到底哪个才是目的带。是不是抗体放了几个月，会出现这样的问题？

还是一抗孵育时间的问题？之前20h没有杂带，但是有背景。后来就缩短了时间，背景浅了，但是有杂带

吐温有影响吗？之前是0.05%,后来试了0.1%，条带都不清楚了。

一抗浓度说明书上说1:100-1:1000.试过1:500,1:1000,1:2000杂带情况没有改善。