2013年5月31日我在做肝癌组织中HIF-1α的WB,多交流。 我买的R&D的抗体,说明书上条带显示分子量在120KD左右。 30moonriver (2013-5-31 16:00:54) 怎么每个人有每个人的说法啊?...

最佳答案: 27kd和24kd蛋白做wb是不能分开的，但是可以分别检测出来 一般来讲，要分开不同分子量大小的蛋白，要通过SDS-PAGE来实现。但是27kd和24kd差距太小，在正常的SDS凝胶....new-pmd .c-abstract br{display: none;}更多关于【求助】谁做过Hif1a的WB,能在120KD做出来吗的问题>>

近日，欧盟委员会批准Truxima（利妥昔单抗生物类似药）在欧盟用于参比药物利妥昔单抗所有的适应证。它是全球首个获批用于肿瘤适应证的单克隆抗体生物类似药，主要用于大B细胞淋巴瘤、滤泡性淋巴瘤及慢性淋巴细胞白血病、非霍奇金淋巴瘤、多血管炎及微小多血管炎型肉芽肿病等癌症的治疗。

证据表明，从有效性、安全性、免疫原性、药效学及药动学来看，Truxima与参比药物用于类风湿关节炎及晚期滤泡性淋巴瘤时有惊人的相似性。这些试验在600多名患者中进行，包含了104周的治疗数据。

「我们很高兴在肿瘤领域提供首个单克隆抗体生物类似药。我们将与我们欧洲的合作伙伴一起努力，确保Truxima可供应用于能从这款药物获益的众多患者」，Celltrion主席Seo称，该公司生产这款生物类似药。

ClaudeBernard大学教授、里昂平民疗养院血液内科主任、晚期滤泡性淋巴瘤研究全球主要研究者Coiffier博士称，「利妥昔单抗生物类似药在一项大型试验项目中已表现出与参比药物利妥昔单抗有相似的有效性与安全性，大型试验项目为两款药物的类似性提供了令人信服的证据。这已得到监管当局的认可，在这一领域，希望这能够为进一步的创新铺平道路」。

生物类似药的获益

「假如利妥昔单抗生物类似药的定价是参比药物利妥昔单抗的70%，其第一年的市场份额达到30%，第二年达到40%，第三年达到50%，那么欧盟28个成员国的预算节约将在5.7亿欧元左右，」布达佩斯考文纽斯大学的卫生经济学系主任Gulácsi称。「这等同于4.9万新的类风湿关节炎、非霍奇金淋巴瘤及慢性淋巴细胞白血病患者可以接受到改变生命的治疗药物」。

「对于负担了高费用肿瘤治疗药物的医疗体系来说，我们很高兴可以提供一种治疗选择，这种治疗选择有可能明显降低成本，同时确保患者可以获取高质量及有效的治疗药物。」

生物药物

自生物药物于1998年上市以来，其在癌症治疗中已导致了显著的改善，但越来越多的使用已导致欧洲医疗体系很高的财政负担，在成本意识时代，新的癌症治疗药物有时也需要为获得支持而进行竞争。

成本节约

2015年，参比产品利妥昔单抗是全球最畅销癌症药物，该药物在全球范围内消耗了医疗体系71亿美元。Truxima旨在以参比产品较低的价格销售，所以使用利妥昔单抗生物类似药，其成本节约将能使需要新的创新型癌症治疗药物的患者获取到药物。

分销

Truxima是上市的第二个单克隆抗体生物类似药，其由Mundipharma在欧洲的网络进行分销，该公司已在2015年推出首个英利昔单抗生物类似药单克隆抗体。「Mundipharma一直在寻求机会为复杂的成本意识世界开发与商业化可持续的负责任的药物，」Mundipharma总经理Mattessich称。

27kd和24kd蛋白做wb是不能分开的，但是可以分别检测出来 一般来讲，要分开不同分子量大小的蛋白，要通过SDS-PAGE来实现。
但是27kd和24kd差距太小，在正常的SDS凝胶上都很难完全的分开 但是通过wb可以分别检测出来，只需要找到分别特异性结合的抗。
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【求助】HIF-1a的分子量到底是多少？ HIF-1a的分子量到底是多少？有人做组织中提取的HIF-1A的WB么？查看完整版本请点击这里：
【求助】HIF-1a的分子量到底是多少？

我也来说两句 查看全部回复 abc816 (2013-5-31 15:58:39) 兄弟 好 我在做肾脏组织的HIF-1a 它的分子量是120Kd。。。
有机会多多交流 +小生怕怕+ (2013-5-31 15:59:03) 我买了一个ABCOM 的一抗，怎么上面显示的是93KD呢？ wood533 (2013-5-31 15:59:22) HIF-1α的预测分子量为93kD，在变性充分的情况下可以检测到93kD的HIF-1α条带，在很多情况下可以检测到分子量为120kD左右的HIF-1α条带，原因不详。 redbutterfly (2013-5-31 16:00:28) 相关疾病：
肝癌
我在做肝癌组织中HIF-1α的WB，多交流。
我买的R D的抗体，说明书上条带显示分子量在120KD左右。 30moonriver (2013-5-31 16:00:54) 怎么每个人有每个人的说法啊？我查出来的资料说是132KD,干将莫邪是苏大这边的吗，你要做HIF-1A的WESTERN吗？ IAM007 (2013-5-31 16:01:53) 我做过骨骼肌组织的HIF-1a，分子量100K左右 qianqin1977 (2013-5-31 16:03:19) 你好，你现在HIF-1A的WESTERN 做出来了吗？ +小生怕怕+ (2013-5-31 16:05:45) 还没做呢，现做的是其他的指标的检测 xue258 (2013-5-31 16:53:01) 我做细胞的是120KD ,但是条带不清楚,我用的是快速提取蛋白法,大家有没有好办法做出来的? 33号 (2013-5-31 16:54:50) 似乎在做此指标的战友 都做的不是很理想 回复一下 希望有高人指点啊 呵呵 +小生怕怕+ (2013-5-31 16:55:25) 我做了几次，都没做出来啊，虽然在胶及转膜后的膜染色，在120KD左右都有很清晰的但是很细的条带，结果就是不出啊 89tongzijun (2013-5-31 16:55:45) 我也做hif-1a，查过几个公司，对于它的分子量也是说法不一，但是文献上大多只说在120kd。我现在也主要检测这个位置的条带，暂时不是太理想。
建议你孵抗体之前裁膜裁的宽一些，因为我们有经验就actin在跑不同浓度的分离胶的时候，它有时就在marker上面，有时就在下面，说不好什么原因。最好不要因为裁的膜过窄把目的条带裁下去了。
ps：你用的哪个公司的抗体啊？ jrwyyplt (2013-5-31 16:56:46) 我做了几次，基本上都有条带的，在130KD 左右。 summerxx (2013-5-31 16:57:18) 楼上的你好啊 我也在做这个指标 我做出来 目的条带也是在130kd左右
还以为是假的呢 都怀疑预染的蛋白marker是不是不准确了
现在知道你也是这种情况 就放心多了 多多交流 wood533 (2013-5-31 16:58:26) 我后来做的不是条带不出来，就是没有趋势，能否交流下细胞裂解液的配方，电泳，转膜的条件？？谢谢 wsll (2013-5-31 16:58:47) 刚做完了,HIF-1BETA出来了,就是HIF-1ALPHA出不来,到底怎么回事? 831226 (2013-5-31 17:04:48) 呵呵，前段时间也一直在纠结这个蛋白的wb，最近两天用HepG2细胞经过CoCl2处理以后发现结果还行，就是有个问题，低浓度的Cocl2处理Hif1a多，比control多不少，而高浓度处理24小时反而一点都没有了，奇怪。另外我用的是Abcam的一抗，1：2000，目的分子量约为120，背景还算干净。 查看全部回复 我也来说两句