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做荧光抗体试验时,定量测定荧光素的含量用到的是哪个波长?
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回复:时间:2018-02-05
荧光光谱包括吸收波长和发射波长两种。激发波长是荧光物质在不同波长的激发光作用下测得的某一波长处的荧光强度的变化情况,也就是不同波长的激发光的相对效率;从而可以根据不同波长产生吸收光谱。发射波长则是某一固定波长的激发光作用下荧光强度在不同波长处的分布情况,也就是荧光中不同波长的光成分的相对强度,从而检测荧光物质在不同波长的激发光作用下测得的某一波长处的荧光强度的变化情况。
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回复:时间:2018-02-04
荧光属于光致发光,需选择合适的激发光波长(Ex)以利于检测。激发波长可通过荧光化合物的激发光谱来确定。激发光谱的具体检测办法是通过扫描激发单色器,使不同波长的入射光激发荧光化合物,产生的荧光通过固定波长的发射单色器,由光检测元件检测。最终得到荧光强度对激发波长的关系曲线就是激发光谱。在激发光谱曲线的最大波长处,处于激发态的分子数目最多,即所吸收的光能量也最多,能产生最强的荧光。当考虑灵敏度时,测定应选择最大激发波长。荧光激发波长对应于某一个紫外可见光谱吸收波长,可能稍大一些,不完全相等。你可以将紫外吸收波长设为激发波长,扫描发射光谱,然后再固定发射波长扫描激发光谱,得到最大激发波长,再做发射光谱,再做激发光谱,一直到得到固定不变的激发和发射波长为止。紫外吸收波长可以作为激发波长,激发波长的选择不影响发射波长的选择,理论上激发光谱和发射光谱有一个镜像关系,很多人就误以为,激发波长和发射波长时一一对应的,其实不然,激发光谱的强弱只代表该物质在所选择的激发波长下被激发的比率,其发射光谱还是原来形状的光谱,只是在强弱上改变.我们选择最大激发波长是为了获得高激发率的物质形态,间接提高灵敏度,选择最大发射波长是为了直接提高灵敏度展开
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回复:时间:2018-01-31
荧光素本品为诊断用药,是一种染料,对正常角膜等上皮不能染色,但能对损伤的角膜上皮染成绿色,从而可显示出角膜损伤、溃疡等病变。本品流经小血管时,能在紫外线或蓝色光激发下透过较薄的血管壁和黏膜呈现绿色荧光,从而显示小血管行经和形态等,据此可供眼底血管造影和循环时间测定。本品几乎不能透过血脑屏障,但在结核性脑膜炎时脑脊液内含量有所增加,肌内注射后测定脑脊液内本品含量有助于对结核性脑膜炎的诊断和鉴别诊断。供诊断眼角膜损伤、溃疡和异物,眼底血管造影和循环时间测定。也用于术中显示胆囊和胆管,以及结核性脑膜炎的辅助诊断等。"一滴8块钱!还要交检查费!"这是医院的价格规定的。不过说来也是比较贵,只要身体健康,钱财乃身外物
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