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双荧光素酶报告基因检测实验
一、技术简介
荧光素酶(Luciferase)是生物体内催化荧光素(luciferin)或脂肪醛(fireflyaldehyde)氧化发光的一类酶的总称。双荧光素酶报告基因系统是以荧光素(luciferin)为底物来检测萤火虫荧光素酶活性的一种报告系统,通常采用第二个报告基因(如海肾荧光素酶报告基因)来减少实验的变化因素。荧光素酶可以催化荧光素氧化成氧化荧光素,在荧光素氧化的过程中,会发出生物荧光。然后可以通过荧光测定仪测定荧光素氧化过程中释放的生物荧光。荧光素和荧光素酶这一生物发光体系,可以极其灵敏、高效地检测基因的表达。是检测转录因子与目的基因启动子区DNA相互作用的一种检测方法。
二、实验流程
1.构建表达载体和荧光素酶报告基因表达载体(或由客户提供)。
2.细胞培养及质粒共转染。
3.荧光素酶活性检测。
三、服务说明及结果
1.客户提供:含有目的基因的pGL与pRL系列质粒(分别含有萤火虫荧光素酶和海肾荧光素酶报告基因)或其它相关质粒(要求可以直接用于转染,浓度≥0.5μg/μl,提供10μg)、细胞。
2.公司提供:原始实验数据、实验报告。
3.实验周期:15个工作日。
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