一、组织培养细胞的染色

1.通过对悬浮培养中的细胞倾析或对单层培养的细胞蛋白酶消化来收获细胞。计数细胞，800g慢速离心3分钟沉淀细胞。

2.细胞染色。

3.在NST-DAPI缓冲液中于冰上孵育细胞15分钟。

4.用35μm孔径的尼龙筛目过滤细胞。

5.用流式细胞计量术分析染色细胞。

二、固体组织的染色

1.如冷冻，将组织片放入装有补充5%小牛血清和10%DMSO的MFM的冷冻管中，置冰上，-70℃冷冻。制备时，在37℃水浴中快速融解。不用的组织可以重新冷冻。

2.组织染色。

(1)PI染色

①取约2~3mm³的组织片放入60mm的培养皿中，加0.5~1.0ml柠檬酸缓冲液，将培养皿置冰上或冷藏盒中。

②用2枚解剖刀片将样品交叉切碎，剪切切碎的样品，首先几次通过RaininP1000加样器尖，然后几次上下通过结核菌素注射针。不要企图将明显过大的片段通过注射针。

③将样品转移到一5ml的一次性培养管中，取200μl样品放入一支新管，加入800μlDNA染色/裂解溶液，20μl煮沸过的RNA酶A进行步骤3。

(2)DAPI染色

①取约2~3mm³的组织片放入60mm的培养皿中，加0.5~1.0mlNST-DAPI缓冲液，将培养皿置冰上或冷藏盒中。

②用2枚解剖刀片将样品交叉切碎，剪切切碎的样品，首先几次上下通过结核菌素注射针。不要企图将明显过大的片段通过注射针。

③将样品转移到一5ml的一次性培养管中。

3.在冰上孵育培养管15分钟。

4.用35μm孔径的尼龙筛过滤样品。

5.用流式细胞计量术分析。样品可加入10%DMSO冷冻于-70℃，用于以后重新分析或分类。