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放射自显影原位杂交玻片的复染和压片固定实验一苏木精/伊红染色

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实验方法原理
实验材料	水化并显影的原位杂交玻片
试剂、试剂盒	苏木精染料（用乙酸处理的Harris改进苏木精无汞)0.1%氢氧化铵伊红染料
仪器、耗材	玻璃染色盘
实验步骤	1)将显影过的载玻片（在玻片架中）放入盛有水的染色盘中。 2)在染色盘中准备以下各组液体： 1个盘：苏木精染液 2个盘：水 1个盘：0.1%氢氧化铵 2个盘：水 1个盘：伊红染液 1个盘：95%乙醇 2个盘：100%乙醇 3个盘：二甲苯 3)在苏木精染液中染玻片20〜30s，勿染过深。水中浸泡2次，每次2min。 4)快速浸于0.1%氢氧化铵，然后浸入水中。如果在0.1%氢氧化铵中浸泡时间过长，放射自显影乳胶会从玻片上脱离。 5)以水浸洗5min,然后用伊红染色20〜30s。如染色过深，可将玻片浸于50%乙醇中，脱色片刻（观察染料扩散状况）；如染色过弱，可再染。 6)在同一盛95%乙醇的盘中，浸洗玻片8次，然后，于100%乙醇中浸8次，再置100%乙醇中2min使完全脱水。在二甲苯中平衡3次，每次2min。 7)按基本方案步骤5〜9操作，进行固片处理。
注意事项
其他