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PVDF膜上蛋白的可逆染色
实验材料 | 蛋白 试剂、试剂盒 | AmidoBlackisopropanolaceticacid考马斯亮蓝methanolPonceauSinTCAEtOHHACNa2S2O3AgO3Na2CO3MeOHAgNO3甲醛 仪器、耗材 | PVDF膜
实验步骤 | Western杂交时,为确认蛋白是否转至PVDF膜上,可用下列方法对膜上蛋白进行可逆性染色。 1. 氨基黑染色 染液:0.5%AmidoBlack(w/v),25%isopropanol(v/v)and10%aceticacid. 染色:将PVDF膜置于染液中染色数钟,ddH2O脱色。 2.考马氏亮蓝染色 染液:0.1%CoomassieBrilliantBlueR-250(w/v)and50%methanol(v/v) 脱色液:40%methanol(v/v)with10%aceticacid(v/v) 染色:将PVDF膜置于染液中染色15min.,脱色液脱色。 3.丽春红染色PonceauS 染液:0.2%w/vPonceauSinTCA(3%v/v) 染色:将PVDF膜置于染液中染色5min 脱色:ddH2O脱色
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