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2016-11-03扩增一个没有模板已知核苷酸序列的片段

棉花梗
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以前听说过设计引物，以引物互为模板进行PCR获得的引物二聚体就是目的片段

有没有人具体操作过呢？应该注意什么问题呢？比如引物设计，体系，PCR程序

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相关回复

已帮助 0人

回复：时间：2016-11-13

如果不是很长可以直接公司合成

有用（0）

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回复：时间：2016-11-12

如果可以用引物互为模板，就说明不是很长的片段，可以直接合成啊

有用（0）

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回复：时间：2016-11-05

1.你的问题，可不可以这么理解，是目前已知核苷酸序列，但是没有在文献中查到如何扩增这段序列，如引物，温度等。2.如果是这种情况的话，引物设计可以有两个选择：（1）用prime5自己设计。（2）找公司给你设计引物。3.至于温度，可以跑梯度PCR进行确定最合适的退火温度。然后进行扩增就可以了。4.建议多了解一下这方面的知识。

有用（0）

已帮助 0人

回复：时间：2016-11-08

Blast后，跟已知序列比较。

有用（0）

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回复：时间：2016-11-07

bokeeniuBlast后，跟已知序列比较。可是blast没有相似序列

有用（0）

已帮助 0人

回复：时间：2016-11-12

如果是编码序列的话，翻译成蛋白序列Blast，否则只能通过Race验证了。

有用（0）
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