电泳缓冲液

2021-07-24【求助】几种蛋白电泳缓冲液的异同 以及PVDF转膜过程中缓冲液要加甲醇吗

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目前常用的SDS-PAGE电泳缓冲液有:
Tris-Glycine/SDS;
MOPS/SDS;
Bis-Glycine/SDS等不同的缓冲液、预混液等。
不知道这几种缓冲液有什么异同呢?
比如如果是Invitrogen的预制胶-预混液电泳系统,每种预制胶有适配缓冲液,但是如果用其他的缓冲液似乎也可以得到不错的结果,那么是否说明电泳缓冲液只要满足了缓冲ph范围,其他的不是特别重要呢?
此外,附加提问是,PVDF膜在转膜的时候,转膜缓冲液中不需要加入甲醇,那么是加入甲醇转膜效果好还是不加好呢?
谢谢!
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相关回复

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回复:时间:2021-07-29

我自己来回复吧= =|||是的,在非极端情况下,几种缓冲液可以混着用。但是条带大小会有漂移。PVDF膜在转膜的时候加不加甲醇影响不大,只要之前充分浸泡过就好了。

已帮助 0

回复:时间:2021-07-24

缓冲液提供合适的pH值,提供足够的带电离子。也许SDS还能弥补转膜过程中从蛋白肽链上脱落的部分SDS。甲醇可增加PVDF膜对蛋白的吸附能力。

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回复:时间:2021-07-27

Methanolisonlynecessaryifusingnitrocellulose.IfusingPVDF,methanolcanberemovedfromthetransferbufferaltogether,andisonlyneededtoactivatethePVDFbeforeassemblingthegel/membranesandwich.