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如何倒好平板?献给初学者!
提到倒平板,很多人会觉得那不是很简单。真的是这样吗?你倒一次就知道,要么倒厚了,要么薄了,要么有气泡,搞不好还染菌了。看上去简单的操作,其实也是暗藏玄机,我们的《献给初学者》系列,将从这些基础入手,给大家支招。
防止冷凝
有经验的都知道,手心不烫手背烫,这是一个经验数据,也就是说温度在45度左右,最适合倒平板。
如果要连续倒多个培养皿,尤其是在冬天往往容易凝固,一旦凝固则需要再加热到较高温度才能融化。怎么办呢?恒温水浴锅是个不错的东西,保持50度开着。要是培养皿凝固了,就把装培养基的三角瓶放进去,问题也就解决。
冷凝水和气泡
一般来说,冷凝水都会有几滴,影响不大,如果过多则需要注意。倒培养皿前将平皿尽量保持在35~40度的温度,保持平皿静置环境温度高一些。
要想避免在倒平板时产生气泡,培养基加热不要过高,融化即可。倒的时候要慢点,最好能够贴着平皿的壁倒下去。
倾注平皿要左三圈,右三圈的晃动,不要把平皿盖沾上,并且要轻轻晃动。
倒已冷却的琼脂培养基
对已冷却的培养基再融化会比较麻烦,因为放在电炉上烤不仅需要耐心,还得格外小心,一不留神就会冲湿瓶塞。重新放入灭菌锅加热又费事。
解决方法是用微波炉加热,又快又好,融得彻底,用着放心。当然,装培养基所用的三角瓶得能够放入微波炉才行(250mL)。
没有微波炉怎么办?用电炉要小心了,在电炉上直接加热融化营养琼脂时应注意在融化到上面剩最后薄薄的一层时改用小火,缓慢加热,防止气体冲破薄层时导致爆沸,琼脂冲出三角瓶。
小细节
倒培养皿的最适温度建议保持在35~ 40度,但不同品牌的琼脂质量不一样。同样按照国标中的配方琼脂含量1.5%,有些琼脂凝固很快,有些凝固慢一些,还有环境温度偏低,琼脂凝固也会快一些。
所以要根据实际情况,适当调整琼脂的含量,在室温较低时我们所配的培养基琼脂用量就偏少一些,还有在倒平板和混匀时动作要快一些,室温实在太低,也可以把培养皿放到烘箱中适当加热一下(40度左右)。
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