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2017-10-10玻璃组织匀浆器的使用方法

strongsmile
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弱弱的问一下，
用匀浆缓冲器研磨动物组织之前必须把组织剪成很小的小块吗？
使用匀浆器的时候都要用匀浆缓冲液么？
匀浆缓冲液的作用是什么？怎样选择用什么样的缓冲液呢？
如果液体少，研磨好的组织很难从研磨器中倒出来，有什么好办法么？
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回复：时间：2017-10-21

1、要，因为好磨2、要缓冲液3、一方面是好倒出来，另一方面是稳定细胞破碎后的某些物质或者便于分离。（如缓冲液里面加有Ca2+，钙离子能够促进质膜碎片的聚集）。至于用什么要看你的组织是什么4、缓冲液在磨样的时候只加一小部分，其他的就是在磨完后冲洗匀浆器的如， 最常用的匀浆介质为等渗的蔗糖(0.25mol／L)和氯化钾(0.154mol／L)。蔗糖为经典亚细胞组分分离研究所选用，而氯化钾更适合外源化学物代谢酶的研究，如它可更有效除去微粒体制备物中的血红蛋白，减少光谱测定的干扰。匀浆介质在使用前应将pH调至7.4左右。匀浆缓冲液可含有5~50mmol／L的Tris或Hepes。大多数研究中常用的匀浆缓冲液为含0.154mol／LKCl的50mmol／L Tris•HCI缓冲液，pH7.4。此缓冲液在4℃条件下，至少贮存12周不变质。

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