相关文章
促销商品
最新问答
- [09-16]关于克隆技术弊大于利的辩论稿
- [09-04]基因克隆载体
- [08-30]肠道病毒71型（EV71）感染性克隆的构建
- [08-09]关于RNAi干扰的问题 分子生物 干扰/敲除 论坛学术...
- [08-12]【求助】我有N套慢病毒系统,谁知道哪个效率高? 另附包lenti的...
- [08-17]【求助】克隆了一段启动子序列就是连不到T载体上 核酸基因技术...
- [08-28]一种克隆新基因的试剂盒及其应用方法_宁夏技术市场
- [04-13]中国两种地方猪种内源性逆转录病毒检测与亚型分析
- [12-02]病毒的复制循环分为哪几个阶段,各个阶段的主要过程如何?_
精选品牌
热卖商品
计划以RNA为模板，设计引物进行全长CDNA片段的扩增，cDNA全长有7kb，不知道谁有没有做过类似的？我们老板说有人构建成功过，但不知道采用什么技术手段？我们之前是先以RNA为模板反转录合成第一条cDNA片段，再设计引物扩增2条片段，最后将2条片段连起来，但是构建的克隆也不成功。所以求助能否直接PCR得到全长cDNA片段，各位高人看看能否指点一二，谢谢啦！
相关回复
-
已帮助 0人
-
已帮助 0人
-
回复：时间：2012-05-27
群众再设计引物扩增2条片段，最后将2条片段连起来这句话什么意思？7KB比较长，建议使用TACLONE办法之前我们采用的方法是先用随机引物p出来CDNA第一条片段，再以它为模板分别设计两对引物，一对是p前一段cDNA的，另一对是后一段的，扩增前后两条片段再把拼接在载体上。我最近看到好像用RACE技术可以直接获得全长cDNA，但是对这个用不太懂，RACE技术好像都是说以mRNA为模板进行PCR，不知道总RNA可不可以做？
-
已帮助 0人
-
已帮助 0人
-
回复：时间：2012-05-19
展开引用jingjae计划以RNA为模板，设计引物进行全长CDNA片段的扩增，cDNA全长有7kb，不知道谁有没有做过类似的？我们老板说有人构建成功过，但不知道采用什么技术手段？我们之前是先以RNA为模板反转录合成第一条cDNA片段，再设计引物扩增2条片段，最后将2条片段连起来，但是构建的克隆也不成功。所以求助能否直接PCR得到全长cDNA片段，各位高人看看能否指点一二，谢谢啦！......难度不小，交给我们公司来做吧
相关问题
- 1631728806关于克隆技术弊大于利的辩论稿
- 1630692002基因克隆载体
- 1630260002肠道病毒71型（EV71）感染性克隆的构建
- 1628445603关于RNAi干扰的问题 分子生物 干扰/敲除 论坛学术...
- 1628704801【求助】我有N套慢病毒系统,谁知道哪个效率高? 另附包lenti的...
- 1629136801【求助】克隆了一段启动子序列就是连不到T载体上 核酸基因技术...
- 1630087204一种克隆新基因的试剂盒及其应用方法_宁夏技术市场
- 1113362100中国两种地方猪种内源性逆转录病毒检测与亚型分析
- 1512204025病毒的复制循环分为哪几个阶段,各个阶段的主要过程如何?_
- 1627322405斐林试剂和双缩脲试剂区别
- 1630605602多片段一步克隆试剂_克隆试剂盒_克隆/表达分析_生化试剂...
- 1630519202克隆新基因cDNA全长的策略和方法
推荐产品
