ClonExpress®UltraOneStepCloningKit

无缝克隆、随心所欲

• 快速：5-15min快速重组；
• 简单：一管式Mix，操作简便；
• 高效：高效克隆50bp～10kb片段，阳性率>95%；
• 兼容：单片段、多片段、入门克隆三合一；
• 零背景：提供零背景、氨苄/卡那双抗性载体；

高度简化的实验流程

通过PCR扩增，使插入片段5’和3’最末端分别带有和线性化载体两末端一致的序列(15-20bp)。用2×ClonExpressMix，50℃反应5-15min，进行重组。重组产物直接转化感受态细胞，平板上会形成数百个单克隆供阳性筛选。

ClonExpress®Ultra单片段同源重组原理图

优异的克隆效率

试剂盒能够高效克隆50bp-10kb片段，不同长度单片段50bp、2kb、4.5kb、7.5kb、10kb；多片段：四个片段（3kb）、三个片段（10kb）、五个片段（3kb）、五个片段（6kb），纯化后分别与pCE-Zerovector进行同源重组，重组产物转化化学感受态细胞DH5α（Vazyme#C502），菌落数如下图所示。

试剂盒独特的非连接酶依赖体系，无载体自连，克隆阳性率高达95%以上。重组产物转化平板后，各挑取50个单克隆进行菌落PCR鉴定，不同长度插入片段阳性率如下图所示。

广泛的体系兼容性

试剂盒兼容1至5个片段同源重组，搭配Vazyme高保真酶，PCR产物可不经过纯化直接进行克隆。重组产物转化化学感受态细胞DH5α（Vazyme#C502），XL10（Vazyme#C503），Fast-T1（Vazyme#C505），得到较高克隆效率。

载体序列信息及测序方案

pCE-Zerovector载体，测序时使用通用测序引物（M13）即可。

ClonExpress®UltraOneStepCloningKit是新一代的重组克隆试剂盒，可快速高效的将1-5个片段定向克隆至任意载体的任意位点，高度优化的2×ClonExpressMix，50℃反应5-15min完成重组，操作简单快捷。

引物设计：

下载引物设计软件CEDesign进行引物设计