DNA文库制备试剂盒
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各位好,希望能得到你的建议与帮助!
从人的冰冻组织提取DNA,Nanodrop定量纯度a260/a280在1.86左右,qubit2.0定量浓度达到了100ng/ul以上,按照Thermo的建库试剂盒操作,建库完成后,利用qPCR进行文库定量,有几个文库定量值只有20pM,问题在哪呢?
我试着更换Barcode重新建库,部分文库定量居然达到了600多pM,问了技术支持,他们也没有相关经验,请问群里的大神可否遇到过?
建库试剂盒是在保质期内IONAmpliseqlibrarykit2.0,引物是2013年自己定制的panel,一直储藏在-20℃冰箱,Barcode超出保质期半年。
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