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之前一直都好好的，就是突然内参做不出来了，条件什么都没变。排查了一个多月了，也换了一抗和二抗。可还是做不出来。用丽春红染，有蛋白在膜上。就是敷完抗体之后曝不出来。但最近曝光的时候，可以发现内参条带很弱，基本上没有，但旁边的Marker却曝出来的很明显，这是什么原因呢？求大神解答。
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回复：时间：2017-08-21
同问。一样的条件在跑，突然间曝光变得很吃力，以为可能是一抗效价不行了，毕竟用了一个多月了，就换了新的一抗，结果依然是空白条带。楼主要是有什么发现，麻烦告知。
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回复：时间：2017-08-27
铜钱草草同问。一样的条件在跑，突然间曝光变得很吃力，以为可能是一抗效价不行了，毕竟用了一个多月了，就换了新的一抗，结果依然是空白条带。楼主要是有什么发现，麻烦告知。你的做出来了么
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回复：时间：2017-08-24
Dynamite115我的今天做出来，把Marker剪掉开始孵育的一抗。做出来有条带，但是很淡。跟以前比还是不太正常。我出来了部分。同一抗体同时孵育的两个条带曝光难易程度差很多。明天在看看内参。我有点怀疑我的一抗是不是不行了。
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回复：时间：2017-08-27
cecily0000001那除了actin，此次试验的其他抗体的带夜视这个情况吗内参和其中一个目的最近都正常了。另外两个目的我觉得可能是一抗的问题，这俩抗体一开始连条带都没有，现在慢慢出来了，就是条带不明显，背景高。当初买来刚用的时候也是条带不明显背景高，然后慢慢清晰。难道要多用几次？
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回复：时间：2017-08-20
铜钱草草内参和其中一个目的最近都正常了。另外两个目的我觉得可能是一抗的问题，这俩抗体一开始连条带都没有，现在慢慢出来了，就是条带不明显，背景高。当初买来刚用的时候也是条带不明显背景高，然后慢慢清晰。难道要多用几次你的内参是怎么出来的，换了一抗么？
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